蛋白酶系列_酸性蛋-白酶(ACP)測(cè)試盒
測(cè)定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
注 意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
ACP是一種在酸性環(huán)境下催化蛋白質(zhì)水解的酶。該酶主要用于酒精發(fā)酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。
蛋白酶系列_酸性蛋-白酶(ACP)測(cè)試盒
測(cè)定原理：
酸性條件下，ACP催化酪蛋白水解產(chǎn)生酪-氨酸；在堿性條件下，酪-氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍(lán)；鎢藍(lán)在680nm有特征吸收峰，通過(guò)測(cè)定其吸光度增加，來(lái)計(jì)算ACP活性。
自備儀器和樣品：
水浴鍋、磁力攪拌器、可調(diào)式移液槍、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、0.5 mL EP管和蒸餾水。
試劑組成和配置：
液體一：2mL×1支，4℃保存。
液體二：1mL×1支，4℃保存。
試劑一的配制：臨用前按液體一：液體二：蒸餾水=90（μL）：20（μL）：21（mL）的比例配制，現(xiàn)配現(xiàn)用，如出現(xiàn)白色絮狀沉淀則不能用。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加4mL蒸餾水溶解。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加入10mL試劑一，沸水浴中磁力攪拌溶解。（可在燒杯上蓋一層保鮮膜，注意觀察，避免水分全部蒸發(fā)，一般加熱15-30分鐘，該試劑為過(guò)飽和試劑，充分混勻后仍出現(xiàn)顆粒物不溶物不影響使用）。
試劑四：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入20mL蒸餾水溶解。
試劑五：液體4mL×1瓶，4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1支，0.25μmol/mL標(biāo)準(zhǔn)酪-氨酸溶液，4℃保存。
粗酶液提?。?br/>
1、試劑一的配制：見(jiàn)試劑的組成和配制。
2、組織：按照組織質(zhì)量（g）：試劑一體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一）冰浴勻漿，8000g，4℃離心10min，取上清，即粗酶液。
3、血清或培養(yǎng)液：直接測(cè)定。
4、細(xì)菌、真菌：按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：試劑一體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬(wàn)細(xì)胞加入1mL試劑一），冰浴超聲波破碎細(xì)胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時(shí)間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測(cè)。
環(huán)保在線