豚鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF) ELISA Kit?品牌：子科生物ZIKER,美國R&D,美國immonoway,美國sciencell,德國IBL
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?服務(wù)：子科生物所有的elisa試劑盒均可免費(fèi)代測，全程Elisa實(shí)驗(yàn)技術(shù)指導(dǎo)。
?運(yùn)輸：全國各地快遞免費(fèi)送貨上門，低溫運(yùn)輸，用冰袋加泡沫保溫盒包裝，確保產(chǎn)品運(yùn)輸狀態(tài)下也處于低溫狀態(tài)。

豚鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF) ELISA Kit標(biāo)本的處理 
可用作 ELISA 測定的標(biāo)本十分廣泛，體液（如血清）、分泌物（唾液）和排泄物（如尿液）、 細(xì)胞培養(yǎng)上清、細(xì)胞、組織等均可作標(biāo)本以測定其中某種成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測定，有些 則需經(jīng)預(yù)處理。 
● 血清： 
室溫血液自然凝固 10-20 分鐘后，離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。收集上清。如 有沉淀形成，應(yīng)再次離心。 
● 血漿： 
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇 EDTA 、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入 10 ％（ v/v ）抗凝劑 ( 0.1M 檸檬酸鈉或 1% heparin 或 2.0%EDTA.Na2) 混合 10-20 分鐘后，離心 20 分鐘左右 （ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形 成，應(yīng)再次離心。 
●尿液、胸腹水、腦脊液： 
用無菌管收集。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成， 應(yīng)再次離心。
●細(xì)胞培養(yǎng)上清：
 檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集 上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的 成份時，用 PBS （ PH7.2-7.4 ）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到 100 萬 /ml 左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。 
●細(xì)胞： 
檢測細(xì)胞的成份時，對于貼壁細(xì)胞，去除培養(yǎng)液，用PBS、理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。加 入適量裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞10 秒后，細(xì)胞 就會被裂解。對于懸浮細(xì)胞，離心收集細(xì)胞，用PBS、理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍.加入適 量裂解液, 用槍吹打把細(xì)胞吹散。用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉 淀。如果細(xì)胞量較多，必需分裝然后再裂解。充分裂解后，10000-14000g離心3-5 分鐘，取上 清，即可進(jìn)行后續(xù)操作。 
●組織標(biāo)本： 
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的 PBS 或組織蛋白萃取試劑，緩沖液中可加入蛋白酶抑制 劑。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心 20 分鐘左右（ 2000-3000 轉(zhuǎn) / 分）。仔細(xì)收集 上清置于 -20 度或 - 70 度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

豚鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF) ELISA Kit操作步驟
1、 取出試劑盒，于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實(shí)驗(yàn)過程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進(jìn)行。
2、 取出酶標(biāo)板，按照標(biāo)準(zhǔn)品的次序分別加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中。
3、空白微孔中加入50μl的樣品，空白對照加入50μl的蒸餾水；
4、 在樣品孔中加入10μl的生物素；(不含空白對照孔,切忌：生物素只加樣品孔！)
5、在各孔中加入100μl的酶標(biāo)記溶液；(不含空白對照孔)
6、將酶標(biāo)板用封口膠密封后，37℃孵育反應(yīng) 1小時；(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7、 充分清洗酶標(biāo)板3-5次，保持各孔有充足的水壓；(濃縮洗滌液以1：100的比例與蒸餾水稀釋)
8、酶標(biāo)板洗滌后用吸水紙*拍干；
9、各孔加入顯色劑A、B液各50μl；(不含空白對照孔)
10、20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘；
11、各孔加入50μl終止液，終止反應(yīng)；

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Thiolite™ Blue    Thiolite™ 藍(lán)    5 mg    1～2周                333
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PhosphoWorks™ phosphatidylserine reagent *Blue fluorescence*      PhosphoWorks™ 磷脂酰絲氨酸試劑（藍(lán)色熒光）    1 mg    1～2周                353
PhosphoWorks™ phosphatidylserine reagent *Green fluorescence*      PhosphoWorks™ 磷脂酰絲氨酸試劑（綠色熒光）    1 mg    1～2周                492
PhosphoWorks™ phosphatidylserine reagent  *Red fluorescence*     PhosphoWorks™ 磷脂酰絲氨酸試劑（紅色熒光）    1 mg    1～2周                546
Calcein       鈣黃綠素    10 mg    1～2周    1461-15-0    C30H26N2O13    622.53     495
Calcein, AM      鈣黃綠素乙酰甲酯    1 mg    現(xiàn)貨    148504-34-1    C46H46N2O23    994.86     495
Calcein blue        鈣黃綠素藍(lán)    25 mg    1～2周    54375-47-2    C15H15NO7    321.28     360
Calcein blue, AM      鈣黃綠素藍(lán)乙酰甲酯    1 mg    1～2周            465.41     360
DiA [4-(4-(Dihexadecylamino)styryl)-N-methylpyridinium iodide]    DiA    25 mg    3～4周    114041-00-8        787.04     491
DiD perchlorate  *Oil* [1,1’-Dioctadecyl-3,3,3‘,3’-tetramethylindodicarbocyanine perchlorate]      DiD 高氯酸鹽    25 mg    3～4周                
DiD triflate [1,1‘-Dioctadecyl-3,3,3’,3‘-tetramethylindodicarbocyanine, triflate]     DiD三氟甲磺酸鹽    10 mg    3～4周                
DiD labeling solution [1,1’-Dioctadecyl-3,3,3‘,3’-tetramethylindodicarbocyanine, triflate] *5 mM DMSO solution*      DiD三氟甲磺酸鹽（5mM DMSO溶液）    10 mL    3～4周            959.91     644
DiIC12(3) perchlorate [1,1‘-Didodecyl-3,3,3’,3‘-tetramethylindocarbocyanine perchlorate]     DiIC12(3)高氯酸鹽    100 mg    3～4周            765.55     549
DiIC12(3) triflate [1,1’-Didodecyl-3,3,3‘,3’-tetramethylindocarbocyanine triflate]  DiIC12(3)      三氟甲磺酸鹽    25 mg    3～4周                
DiOC2(3) iodide [3,3‘-Diethyloxacarbocyanine iodide]      DiOC2(3)碘化物    100 mg    3～4周    905-96-4    C21H21IN2O2    460.31     482
DiOC3(3) iodide [3,3-Dipropyloxacarbocyanine iodide]     DiOC3(3)碘化物    100 mg    3～4周    53213-79-9    C23H25IN2O2    488.36     482
DiOC7(3) iodide [3,3’-Diheptyloxacarbocyanine iodide]     DiOC7(3)碘化物    100 mg    3～4周    53213-83-5    C31H41IN2O2    600.57     482