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南京金益柏wb細(xì)胞收集實(shí)驗(yàn)方法

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南京金益柏生物科技有限公司

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南京金益柏wb細(xì)胞收集實(shí)驗(yàn)方法,針對(duì)WB,南京金益柏特意詳細(xì)列出了具體實(shí)驗(yàn)的方法以及步驟，下面就是實(shí)驗(yàn)的過程：

詳細(xì)介紹

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　　WB收集細(xì)胞：

　　將細(xì)胞培養(yǎng)基棄掉，用PBS清洗兩次，使用*消化細(xì)胞或細(xì)胞刮，將細(xì)胞懸濁液離心1000rpm/5min，棄上清，保留底層細(xì)胞。如要裂解細(xì)胞6孔板（99ulRIPA+1ulPMSF）,細(xì)胞培養(yǎng)皿（198ulRIPA+2ulPMSF），若要做磷酸化蛋白則加如1ul抑制磷酸化蛋白降解抑制劑，加入細(xì)胞裂解液后用移液器將細(xì)胞吹勻，冰上靜置5min，離心4℃ 12500g/5min，吸取上清液，置于-80℃冰箱；若不裂解細(xì)胞，將細(xì)胞置于-80℃冰箱。

南京金益柏wb細(xì)胞收集實(shí)驗(yàn)方法 ?

　　普通PCR收集細(xì)胞：
　　將細(xì)胞培養(yǎng)基棄掉，用PBS清洗兩次，使用*消化細(xì)胞或細(xì)胞刮，將細(xì)胞懸濁液離心1000rpm/5min，棄上清，保留底層細(xì)胞。將細(xì)胞置于-20℃冰箱。
　　qRT-PCR收集細(xì)胞：
　　將細(xì)胞培養(yǎng)基棄掉，用PBS清洗兩次，使用*消化細(xì)胞或細(xì)胞刮，將細(xì)胞懸濁液離心1000rpm/5min，棄上清，保留底層細(xì)胞。加入1ml TRIZOL,置于-80℃冰箱。（注意：本實(shí)驗(yàn)需使用耗材和試劑都為無(wú)RNA酶，PBS必須高壓，離心管和槍頭必須無(wú)酶）

關(guān)鍵詞：移液器

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