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上海研盟生物科技有限公司
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更新時間:2017-01-15 15:18:24瀏覽次數(shù):131次
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上海研盟生物科技有限公司優(yōu)質(zhì)提供“人游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒",規(guī)格48T/96T,提供免費代測服務,有任何質(zhì)量問題或是檢測不出實驗結(jié)果均可免費退換,:.
ELISA試劑盒提供免費檢測服務,我們將根據(jù)實驗工作量和難易程度,雙方協(xié)定實驗周期,保質(zhì)保量完成委托實驗,只收取試劑盒的費用,其他輔助試劑全部免費。
【友情提示】:產(chǎn)品價格與說明書請?zhí)砑? 在線詢價,索要說明書;
【服務優(yōu)勢】:全程提供ELISA實驗技術指導和ELISA試劑盒免費代測
【樣本儲存】:收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶吮?,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。部分激素類標本需添加*。
ELISA檢測試劑盒技術原理:
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結(jié)合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術
產(chǎn)品介紹:
英文名稱:Human free fatty acids,FFA Elisa Kit
中文名稱:人游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒
貨號:BYS10433B
報價::
種屬:人
規(guī)格:96T/Kit(8*12 strips)、48T/Kit(8*6 strips)
檢測方法:雙抗夾心法、雙抗體一步夾心法
用途:本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中待測物質(zhì)的含量。
有效期:6個月
保存條件:2-8℃
操作步驟:
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2.根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復孔的盡量做復孔。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結(jié)果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。
人游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒檢測影響因素分析如下:
一、標本的影響:溶血標本及混有紅細胞的血清采用ELISA法檢測易產(chǎn)生假陽性。可能是溶血血清中含有過氧化酶物質(zhì)(紅細胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),在洗滌過程中往往難以*洗脫,它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧(O),從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì),即顯藍色,產(chǎn)生假陽性[2]。所以嚴重溶血標本禁用。 標本受細菌污染。因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶,因此,被細菌污染的標本同溶血標本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。 標本保存不當。在冰箱中保存過久的標本,在間接法ELISA測定中會導致本底過深、造成假陽性;為克服上述干擾,ELISA試劑盒測定的血清標本宜為新鮮采集;如不能立即測定,5 d內(nèi)測定的血清標本可存放于4℃,1周后測定的血清標本應低溫凍存;凍存后融解的標本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應充分混合后再測定,但混勻時應輕柔,不可強烈振蕩。 塑料試管能吸附抗原物質(zhì),樣本久置在塑料管內(nèi)會使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。使用真空*;并使用非抗凝標本,肝素抗凝血漿會增加OD值,EDTA、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過氧化物酶活性。 標本凝固不全。 在工作中,有時為了爭取時間快速檢測,常在血液還未開始凝固時即強行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測定過程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽性結(jié)果;因此血液標本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。
二、 試劑影響 ELISA試劑盒檢測試劑廠家較多;不同廠家出產(chǎn)的試劑
靈敏度與特異性存在一定的差別,使用質(zhì)劣的試劑必然導致結(jié)果的假陽性或假陰性。因此,選擇高質(zhì)量的上海研盟生物科技有限公司的ELISA試劑盒是保證結(jié)果準確的關鍵之一。
三、操作技術的影響:吸量不準確,直接影響檢測結(jié)果。因此加樣器也要經(jīng)常清洗,定期校準。
溫育影響:抗原抗體結(jié)合及酶促反應對溫度有嚴格要求,酶標板周圍與內(nèi)部孔升降溫速率不同,造成周邊與內(nèi)部孔結(jié)果差異;干浴與水浴存在明顯的差異,盡可能使用水浴,并要求固相板放入水中,減少受熱不均,貼密封膜,防止污物浸入。
加樣次序影響:有時我們在加樣過程中,常常會遇到個別標本未離心等情況,為了節(jié)約時間,往往這時我們會先加酶結(jié)合物,然后等標本分離好后再加標本,這樣,竟常常會造成HBeAb和HBcAb的假陰性。因為HBeAb和HBcAb都是競爭抑制法,先加入酶標記的抗體,首先與固相載體上的抗原結(jié)合,待加入顯色劑后,因酶的存在而顯色,故呈陰性[3]。
綜上所述,對臨床檢驗ELISA測定中出現(xiàn)的假陽性或假陰性結(jié)果,要從多方面進行分析除試劑因素和操作因素之外,更多的應從標本因素方面進行分析,并采取相應措施排除干擾作用。
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