污水處理設(shè)備 污泥處理設(shè)備 水處理過(guò)濾器 軟化水設(shè)備/除鹽設(shè)備 純凈水設(shè)備 消毒設(shè)備|加藥設(shè)備 供水/儲(chǔ)水/集水/排水/輔助 水處理膜 過(guò)濾器濾芯 水處理濾料 水處理劑 水處理填料 其它水處理設(shè)備
上海研盟生物科技有限公司
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所 在 地上海市
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更新時(shí)間:2017-11-03 14:38:31瀏覽次數(shù):247次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 環(huán)保在線上海研盟生物提供美國(guó)ATCC傳代細(xì)胞株“BEL-7405人肝癌細(xì)胞",進(jìn)口來(lái)源,國(guó)內(nèi)保種,活性保證,咨詢:.
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產(chǎn)品名稱:BEL-7405人肝癌細(xì)胞
基本特性:
C細(xì)胞數(shù)量:1000000個(gè)細(xì)胞數(shù)
E細(xì)胞檢測(cè):細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
凍存和復(fù)蘇原則就是:慢凍、快解凍。因?yàn)榧?xì)胞內(nèi)主要成分還是水,在-20℃時(shí)細(xì)胞中的水結(jié)成冰晶,而與水相比,冰的密度小而體積大,會(huì)造成細(xì)胞器膜、細(xì)胞膜的損傷,這樣很容易導(dǎo)致細(xì)胞復(fù)蘇失敗。
細(xì)胞名稱:BEL-7405人肝癌細(xì)胞
組織來(lái)源:肝癌
培養(yǎng)條件:RPMI-1640 +10% FBS
形 態(tài):貼壁;上皮細(xì)胞樣
傳代時(shí)間:2-3天 3-5天
傳代比例:1:2~1:3 1:1~1:2
細(xì)胞活力:95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)安全性:所有細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后,在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
問(wèn):我的實(shí)驗(yàn)是分選癌癥干細(xì)胞進(jìn)行基因組分析,因?yàn)榱魇椒诌x出的腫瘤干細(xì)胞特別少,只有10的4次方,所以選擇了微量的dna和rna提取試劑盒,試劑盒還沒(méi)有到,我打咨詢技術(shù)顧問(wèn)說(shuō)是把分選的BEL-7404細(xì)胞;人肝癌細(xì)胞離心后棄去液體凍到-80度的冰箱,但是實(shí)驗(yàn)室一位師兄說(shuō)這樣不行,rna會(huì)降解,我實(shí)在不知道該怎么辦了,細(xì)胞應(yīng)該怎么保存,求各位大神指點(diǎn)!還有基因測(cè)序?qū)na和rna要求很高,這么少的細(xì)胞提出的dna和rna可以進(jìn)行測(cè)序嗎?
答:細(xì)胞如果裂解后,RNA在普通環(huán)境下會(huì)很快降解。想要不降解,可以考慮:1.加T-Zol裂解液,-80度保存;2.分選后按細(xì)胞凍存步驟凍存,存于-80度,應(yīng)該能放3-6個(gè)月。
復(fù)蘇方法
1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。
2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。
3.剪開(kāi)紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開(kāi)蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。
4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。
5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。
技術(shù)相關(guān)問(wèn)答:
1. 如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基?培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒(méi)有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng)??傊?MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開(kāi)始。2. 何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定, 或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。 3. 可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基, 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基, 細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng), 造成細(xì)胞無(wú)法存活。4.可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的種類和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生*的影響。來(lái)自不同物種的血清, 在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。
來(lái)源有保障(世界*品牌),狀態(tài)且傳代次數(shù)好,經(jīng)測(cè)試不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。每管含有細(xì)胞數(shù)>1000000個(gè),具有高品質(zhì)、高純度、高穩(wěn)定性等特點(diǎn),純化技術(shù)保證產(chǎn)品性能。
運(yùn)輸方式:活細(xì)胞運(yùn)輸(T-25 flasks)。
細(xì)胞純度:95%。
細(xì)胞來(lái)源:ATCC等。
包裝:內(nèi)層無(wú)菌自封袋,防壓泡沫盒,外層防壓保溫氣泡袋,說(shuō)明書。
用途:本產(chǎn)品只提供給進(jìn)一步的科研使用,不可應(yīng)用于治療等其他方面。
細(xì)胞凍存
1.將細(xì)胞消化下來(lái),移入離心管離心,棄上清
2.準(zhǔn)備凍存液比例:50%FBS+40%培養(yǎng)基+10%DMSO(現(xiàn)用現(xiàn)配)
3.加1.5凍存液在離心管中,將細(xì)胞吹打均勻,移入凍存管內(nèi).
放入-20度冰箱2-4小時(shí)后.再放入-80度冰箱過(guò)夜,第二天放入液氮罐保存.
,體內(nèi)、外細(xì)胞的差異和分化:
1、差異:細(xì)胞離體后,失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞間的相互影響,生活在缺乏動(dòng)態(tài)平衡相對(duì)穩(wěn)定環(huán)境,日久天長(zhǎng),易發(fā)生如下變化:分化現(xiàn)象減弱;形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時(shí)間后衰退死亡;或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性,變成可無(wú)限生長(zhǎng)的連續(xù)細(xì)胞系或惡性細(xì)胞系。因此,培養(yǎng)中的細(xì)胞可視為一種在特定的條件下的細(xì)胞群體,它們既保持著與體內(nèi)細(xì)胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能,也有一些不同于體內(nèi)細(xì)胞的性狀。實(shí)際上從細(xì)胞一旦被置于體外培養(yǎng)后,這種差異就開(kāi)始發(fā)生了。
2、分化:體外培養(yǎng)的細(xì)胞分化能力并未*喪失,只是環(huán)境的改變,細(xì)胞分化的表現(xiàn)和在體內(nèi)不同。細(xì)胞是否表現(xiàn)分化,關(guān)鍵在于是否存在使細(xì)胞分化的條件,如Friend細(xì)胞(小鼠紅白血病細(xì)胞)在一定的因素作用下可以合成血紅蛋白,血管內(nèi)皮細(xì)胞在類似基膜物質(zhì)底物上培養(yǎng)時(shí)能長(zhǎng)成血管狀結(jié)構(gòu),雜交瘤細(xì)胞能產(chǎn)生特異的單克隆抗體,這些均屬于細(xì)胞分化行為。
研盟生物其他優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:
人胚腎上皮細(xì)胞,HKC
人腎癌細(xì)胞,A498
人腎癌細(xì)胞,769-P
人腎癌細(xì)胞,OS-RC-2
人腎癌Wilms細(xì)胞,G401
人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞,Caki-2
人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞,786-O
人腎透明細(xì)胞癌皮膚轉(zhuǎn)移細(xì)胞,Caki-1
人腎上腺皮質(zhì)癌細(xì)胞,SW-13
人腎上腺皮質(zhì)腺癌細(xì)胞,NCI-H295R
人腎上腺腺瘤細(xì)胞,NCI-H205
人腎上腺癌細(xì)胞,ACHN
人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞,KP-N-NS
人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細(xì)胞,HK-2
人膀胱癌細(xì)胞,5637(HTB-9)
人膀胱移行細(xì)胞癌,J82
人膀胱移行細(xì)胞癌細(xì)胞,T24
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人惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞/U87MG科研
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