上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間:2017-05-31 09:20:30瀏覽次數(shù):403
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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商,提供人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞;HFSF的報(bào)價(jià),咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱 人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞;HFSF
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 北京眼科研究所建系。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2~1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:10,12;D13S317:10,11;D16S539:9,13;D18S51:17,18;D19S433:13,14;D21S11:31,32.2;D2S1338:18,19;D3S1358:15;D5S818:10,12;D7S820:11;D8S1179:10,16;FGA:18,22;TH01:7,10;TPOX:8;vWA:14;
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞;HFSF培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì):細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細(xì)胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞;HFSF操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
PIGR Kit Mouse 小鼠 PIGR ELISA配對(duì)抗體
DLL4 Kit Human 人 DLL4 ELISA配對(duì)抗體
BSG Kit Human 人 CD147 / EMMPRIN ELISA配對(duì)抗體
PLAU Kit Human 人 Urokinase / PLAU / UPA ELISA配對(duì)抗體
NRP2 Kit Human 人 Neuropilin-2 / NRP2 ELISA配對(duì)抗體
CD5L Kit Mouse 小鼠 CD5L ELISA配對(duì)抗體
DPP7 Kit Human 人 DPP7 / DPPII / DPP2 ELISA配對(duì)抗體
CLEC4A Kit Human 人 CLEC4A / CLECSF6 / DCIR ELISA配對(duì)抗體
FCAR Kit Human 人 CD89 / FCAR ELISA配對(duì)抗體
BAMBI Kit Human 人 BAMBI / NMA ELISA配對(duì)抗體
PBK Kit Human 人 PDK / PDZ binding kinase / TOPK ELISA配對(duì)抗體
SERPINF2 Kit Mouse 小鼠 SerpinF2 ELISA配對(duì)抗體
CD8A Kit Mouse 小鼠 CD8a ELISA配對(duì)抗體
FCGR2B Kit Human 人 CD32b / FCGR2B ELISA配對(duì)抗體
SELL Kit Mouse 小鼠 CD62L / L-Selectin / SELL ELISA配對(duì)抗體
DLL4 Kit Mouse 小鼠 DLL4 ELISA配對(duì)抗體
LILRB3 Kit Human 人 LILRB3 ELISA配對(duì)抗體
LCN1 Kit Human 人 LCN1 / Lipocalin 1 ELISA配對(duì)抗體
IL17RD Kit Human 人 IL17RD ELISA配對(duì)抗體
CD84 Kit Human 人 CD84 ELISA配對(duì)抗體
CD7 Kit Human 人 CD7 ELISA配對(duì)抗體
TNFRSF10D Kit Human 人 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D ELISA配對(duì)抗體
KLK13 Kit Human 人 KLK13 / Kallikrein 13 ELISA配對(duì)抗體
PIGR Kit Human 人 PIGR ELISA配對(duì)抗體
PDGFRA Kit Human 人 PDGFRA / CD140a ELISA配對(duì)抗體
IL3RA Kit Human 人 IL3RA / CD123 ELISA配對(duì)抗體
豬早老素1(PS-1)免疫試劑盒 Acetyl CoA Carboxylase 乙酰羧化酶抗體
豬載脂蛋白E(Apo-E)免疫試劑盒 Phospho-Acetyl Coenzyme A carboxylase alpha (Ser78) 磷酸化乙酰羧化酶抗體
豬載脂蛋白B100(apo-B100)免疫試劑盒 Phospho-Ack1 (Tyr859 + 860) 磷酸化Ack1抗體
豬載脂蛋白A5(apo-A5)免疫試劑盒 phospho-AMPK alpha-1(Ser485+Ser491) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α1抗體
豬載脂蛋白A1(apo-A1)免疫試劑盒 phospho-AMPK beta 1 (Ser108) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體
豬甾體合成急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)免疫試劑盒 phospho-ALK (Tyr1604) 磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體
豬孕激素/孕酮(PROG)免疫試劑盒 phospho-ATM(Ser1981) 磷酸化毛細(xì)血管擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白抗體
豬誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)免疫試劑盒 phospho-ATP citrate lyase (Ser455) 磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體
豬游離脂肪酸(FFA)免疫試劑盒 phospho-ATR (Ser428) 磷酸化ATR抗體
豬游離三碘甲狀腺原氨酸(Free-T3)免疫試劑盒 AMN1 細(xì)胞核重定位及紡錘體檢查點(diǎn)蛋白AMN1抗體
豬游離甲狀腺素(FT4)免疫試劑盒 ALG11 天連接糖基化11抗體
豬乙酰受體抗體(AChRab)免疫試劑盒 ASF1A 細(xì)胞衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體
豬胰高血糖素樣肽2(GLP2)免疫試劑盒 AGPHD1 氨基糖苷類磷酸結(jié)構(gòu)域蛋白抗體
豬胰高血糖素樣肽1(GLP1)免疫試劑盒 ASGPR1 唾液酸糖蛋白受體1抗體
豬胰高血糖素(GC)免疫試劑盒 ARSF 芳香基硫酸酯酶F抗體
豬胰α2(PAMY α2)免疫試劑盒 AKAP5 A激酶錨定蛋白5抗體
豬胰島素原(PI)免疫試劑盒 ATXN3L 小腦脊髓共濟(jì)失調(diào)蛋白3抗體
豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白3(IGFBP-3)免疫試劑盒 ASTE1 ASTE1蛋白抗體
豬胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)免疫試劑盒 phospho-APG4B(Ser309) 磷酸化自噬相關(guān)蛋白4B抗體
豬胰島素樣生長(zhǎng)因子2(IGF-2)免疫試劑盒 AFAP 微絲相關(guān)蛋白1抗體
豬胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)免疫試劑盒 ADORA1 腺苷A1A受體抗體
豬胰島素(INS)免疫試劑盒 ARSB 芳基硫酸酯酶B抗體
豬(Trypsin)免疫試劑盒 ABAT γ氨基丁酸轉(zhuǎn)氨酶抗體
豬一氧化氮(NO)免疫試劑盒 A2BP1 共濟(jì)失調(diào)蛋白2結(jié)合蛋白1抗體
豬氧還原蛋白過氧化物酶2(PRDX2)免疫試劑盒 ADAM17 壞死因子α轉(zhuǎn)換酶
豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)免疫試劑盒 ARNT2 芳香烴受體核轉(zhuǎn)錄蛋白2抗體
豬血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)免疫試劑盒 ABH8 AlkB同源蛋白8抗體
豬血小板活化因子(PAF)免疫試劑盒 ABI3BP ABI基因家族成員3結(jié)合蛋白抗體