上海莼試生物技術有限公司
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更新時間:2017-06-01 08:16:53瀏覽次數(shù):270
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公司是*的ATCC細胞供應商,提供人胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-2的報價,咨詢,稱技術服務,咨詢選購。
細胞名稱 人胚胎心肌組織來源細胞;CCC-HEH-2
形態(tài)特性
生長特性 貼壁生長
特征特性 取材自引產(chǎn)的11周男性胚胎組織,該細胞由中國醫(yī)學基礎醫(yī)學研究所細胞資源中心建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天1次。
傳代情況 P4
凍存條件 基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì):細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
NGFR cDNA Human 人 NGFR 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
TFF1 cDNA Human 人 TFF1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶His標簽
SULT2A1 cDNA Human 人 SULT2A1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
SULT2B1 cDNA Human 人 SULT2B1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
SULT1E1 cDNA Human 人 SULT1E1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 無標簽
RSV-F cDNA Respiratory syncytial virus/RSV 人類呼吸道合胞病毒 hRSV (subtype A, strain Long) Fusion glycoprotein / RSV-F 基因全長ORF克隆 (密碼子優(yōu)化) (表達載體), 帶FLAG標簽
PDCD1 cDNA Human 人 PD1 / PDCD1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
NCSTN cDNA Human 人 NCSTN 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
BMP2 cDNA Human 人 BMP-2 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶HA標簽
BMP7 cDNA Human 人 BMP-7 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
CD27 cDNA Cynomolgus 食蟹猴 CD27 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽
兔單抗
分子名稱 產(chǎn)品類型 種屬 產(chǎn)品描述 用途
RRM2B MAb Human RRM2B / P53R2 Antibody, Rabbit MAb ELISA
S100A13 MAb Human S100A13 Antibody, Rabbit MAb ELISA
M1 MAb Influenza Influenza A H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Matrix protein 1 / M1 Protein 1 Antibody, Rabbit MAb ELISA
BCAM MAb Human BCAM Antibody, Rabbit MAb ELISA
HSF1 MAb Human HSF1 Antibody, Rabbit MAb ELISA
SCGN MAb Human SCGN / Secretagogin Antibody, Rabbit MAb ELISA
MET MAb Human c-MET / HGFR Antibody, Rabbit MAb ELISA
XCL1 MAb Mouse XCL1 Antibody, Rabbit MAb ELISA
IL18 MAb Mouse IL-18 Antibody, Rabbit MAb ELISA
CD302 MAb Mouse CD302 / CLEC13A Antibody, Rabbit MAb ELISA
TFPI2 MAb Mouse TFPI2 Antibody, Rabbit MAb ELISA
FGF14 MAb Human FGF14 / SCA27 Antibody, Rabbit MAb ELISA
TNFRSF10D MAb Human TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D Antibody, Rabbit MAb ELISA
SETD7 MAb Human SETD7 / SET7/9 Antibody, Rabbit MAb ELISA