上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間:2017-06-01 09:17:01瀏覽次數(shù):369
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細(xì)胞名稱 猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4-
形態(tài)特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
猴腎細(xì)胞;vero IgRCD4-實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后,將動(dòng)物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
UGP2 cDNA Rat 大鼠 UGP2 基因全長ORF克隆
MTCH2 cDNA Rat 大鼠 MTCH2 基因全長ORF克隆
MTHFD2 cDNA Rat 大鼠 MTHFD2 基因全長ORF克隆
IMPDH2 cDNA Rat 大鼠 IMPDH2 基因全長ORF克隆
MRPS22 cDNA Rat 大鼠 MRPS22 / LOC683519 基因全長ORF克隆
EIF2S1 cDNA Rat 大鼠 EIF2S1 基因全長ORF克隆
CA3 cDNA Rat 大鼠 CAR3 基因全長ORF克隆
HP cDNA Rat 大鼠 HP 基因全長ORF克隆
AGPAT2 cDNA Rat 大鼠 AGPAT2 基因全長ORF克隆
PRKAG1 cDNA Rat 大鼠 PRKAG1 基因全長ORF克隆
ITM2A cDNA Rat 大鼠 ITM2A 基因全長ORF克隆
BET1 cDNA Rat 大鼠 BET1 基因全長ORF克隆
TNNI1 cDNA Rat 大鼠 TNNI1 基因全長ORF克隆
PRL8A2 cDNA Rat 大鼠 PRL8A2 基因全長ORF克隆
HMGB3 cDNA Rat 大鼠 HMGB3 基因全長ORF克隆
MTFP1 cDNA Rat 大鼠 MTFP1 基因全長ORF克隆
LEPROT cDNA Rat 大鼠 LEPROT 基因全長ORF克隆
ARPC1A cDNA Rat 大鼠 ARPC1A 基因全長ORF克隆
NDUFS2 cDNA Rat 大鼠 NDUFS2 基因全長ORF克隆
MFGE8 cDNA Rat 大鼠 MFGE8 基因全長ORF克隆
SMNDC1 cDNA Rat 大鼠 SMNDC1 基因全長ORF克隆
PRDX1 cDNA Rat 大鼠 PRDX1 基因全長ORF克隆
TGM2 cDNA Rat 大鼠 TGM2 基因全長ORF克隆
COPS4 cDNA Rat 大鼠 COPS4 基因全長ORF克隆
MNAT1 cDNA Rat 大鼠 MNAT1 基因全長ORF克隆
NIT1 cDNA Rat 大鼠 NIT1 基因全長ORF克隆
CLCA1 cDNA Rat 大鼠 CLCA1 基因全長ORF克隆
SEPT2 cDNA Rat 大鼠 SEPT2 基因全長ORF克隆
KDELR3 cDNA Rat 大鼠 KDELR3 基因全長ORF克隆
SGK196 cDNA Rat 大鼠 SGK196 基因全長ORF克隆
TMED10 cDNA Rat 大鼠 TMED10 基因全長ORF克隆
RHD cDNA Rat 大鼠 RHD 基因全長ORF克隆
HSD17B11 cDNA Rat 大鼠 HSD17B11 基因全長ORF克隆
CYP2C23 cDNA Rat 大鼠 CYP2C23 基因全長ORF克隆
ERP44 cDNA Rat 大鼠 ERP44 基因全長ORF克隆
RAB25 cDNA Rat 大鼠 RAB25 基因全長ORF克隆
ANXA8 cDNA Rat 大鼠 ANXA8 基因全長ORF克隆
SLC29A1 cDNA Rat 大鼠 SLC29A1 基因全長ORF克隆