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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間：2017-06-01 09:21:47瀏覽次數(shù)：367
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公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商，提供水牛皮膚成纖維樣細胞；WB-S1的報價，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購。
細胞名稱 水牛皮膚成纖維樣細胞；WB-S1
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細胞系來源于一雌性河川型水牛與沼澤型水牛雜交后代的耳部皮膚組織，2010年由中科院昆明細胞庫建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代；3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì)：細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH：細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。
4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
OLA1 cDNA Rat 大鼠 OLA1 基因全長ORF克隆
PRRC1 cDNA Rat 大鼠 PRRC1 基因全長ORF克隆
TPI1 cDNA Rat 大鼠 TPI1 基因全長ORF克隆
HNRNPC cDNA Rat 大鼠 HNRNPC 基因全長ORF克隆
EHD3 cDNA Rat 大鼠 EHD3 基因全長ORF克隆
ITFG1 cDNA Rat 大鼠 ITFG1 基因全長ORF克隆
ATP5A1 cDNA Rat 大鼠 ATP5A1 基因全長ORF克隆
ACO2 cDNA Rat 大鼠 ACO2 基因全長ORF克隆
AQP9 cDNA Rat 大鼠 AQP9 基因全長ORF克隆
GPX3 cDNA Rat 大鼠 GPX3 基因全長ORF克隆
CYP4A3 cDNA Rat 大鼠 CYP4A3 基因全長ORF克隆
SLC25A17 cDNA Rat 大鼠 SLC25A17 基因全長ORF克隆
SERPINB3A cDNA Rat 大鼠 SERPINB3A 基因全長ORF克隆
RASSF7 cDNA Rat 大鼠 RASSF7 基因全長ORF克隆
FAH cDNA Rat 大鼠 FAH 基因全長ORF克隆
GLB1 cDNA Rat 大鼠 GLB1 基因全長ORF克隆
cDNA Rat 大鼠 基因全長ORF克隆
HMGCS2 cDNA Rat 大鼠 HMGCS2 基因全長ORF克隆
FGA cDNA Rat 大鼠 FGA 基因全長ORF克隆
MAGED2 cDNA Rat 大鼠 MAGED2 基因全長ORF克隆
RASSF6 cDNA Rat 大鼠 RASSF6 基因全長ORF克隆
WDPCP cDNA Rat 大鼠 WDPCP 基因全長ORF克隆
ALDH1A7 cDNA Rat 大鼠 ALDH1A7 基因全長ORF克隆
ASF1B cDNA Rat 大鼠 ASF1B 基因全長ORF克隆
ASS1 cDNA Rat 大鼠 ASS1 基因全長ORF克隆
COMMD10 cDNA Rat 大鼠 COMMD10 基因全長ORF克隆
TAF12 cDNA Rat 大鼠 TAF12 基因全長ORF克隆
ANKRA2 cDNA Rat 大鼠 ANKRA2 基因全長ORF克隆
EEF1A1 cDNA Rat 大鼠 EEF1A1 基因全長ORF克隆
SEP15 cDNA Rat 大鼠 SEP15 基因全長ORF克隆
FSTL1 cDNA Rat 大鼠 FSTL1 基因全長ORF克隆
UQCRC2 cDNA Rat 大鼠 UQCRC2 基因全長ORF克隆
CTSH cDNA Rat 大鼠 CTSH 基因全長ORF克隆
PRRG4 cDNA Rat 大鼠 PRRG4 基因全長ORF克隆
HMGCL cDNA Rat 大鼠 HMGCL 基因全長ORF克隆
DCPS cDNA Rat 大鼠 DCPS 基因全長ORF克隆
ARL1 cDNA Rat 大鼠 ARL1 基因全長ORF克隆
ATP6V1C1 cDNA Rat 大鼠 ATP6V1C1 基因全長ORF克隆
RCN3 cDNA Rat 大鼠 RCN3 基因全長ORF克隆
TAGLN2 cDNA Rat 大鼠 TAGLN2 基因全長ORF克隆
SUCLA2 cDNA Rat 大鼠 SUCLA2 基因全長ORF克隆
TMEM150A cDNA Rat 大鼠 TMEM150A 基因全長ORF克隆
UFD1L cDNA Rat 大鼠 UFD1L 基因全長ORF克隆
