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上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間：2017-06-01 09:25:21瀏覽次數(shù)：296
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細(xì)胞名稱 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞；WB-S3
形態(tài)特性 成纖維細(xì)胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 該細(xì)胞系來源于一雌性沼澤型水牛的耳部皮膚組織，2010年由中科院昆明細(xì)胞庫建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:2傳代；3-4天一次
傳代情況 P2
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類
水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞；WB-S3實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重，然后按10微克／克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后，將動物處死，用剪刀剪開皮膚和肌肉，取出大腿骨和脛骨，剔凈股骨上的肌肉，然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨，用注射器（內(nèi)裝5ml 1％ 檸檬酸鈉溶液）緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中，經(jīng)平衡后離心8分鐘，速度為1000轉(zhuǎn)／分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液，留沉淀物0.2ml，加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度，用吸管沖勻沉淀物，在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后，以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液，留0.2ml沉淀物，沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1～2次，離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液，留0.2ml沉淀物，加4滴新配的固定液，沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片，每片滴3滴細(xì)胞懸液，立即用嘴向載片上吹氣，使細(xì)胞均勻分散，在酒精燈火焰上來回烤一下，以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10：1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH＝6.8磷酸緩沖液稀釋)，然后用水沖洗，片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相，轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目，屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng)：
1.收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)（視細(xì)胞密度而定）穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況，并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片，觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài)，100*，200*各一張），觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐ＷC客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài)，故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時(shí)間證明，期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
CNN3 cDNA Rat 大鼠 CNN3 基因全長ORF克隆
PLEKHB2 cDNA Rat 大鼠 PLEKHB2 基因全長ORF克隆
KPRP cDNA Rat 大鼠 KPRP 基因全長ORF克隆
ACSL1 cDNA Rat 大鼠 ACSL1 基因全長ORF克隆
DSCR3 cDNA Rat 大鼠 DSCR3 基因全長ORF克隆
CTH cDNA Rat 大鼠 CTH 基因全長ORF克隆
MDH2 cDNA Rat 大鼠 MDH2 基因全長ORF克隆
HMGN2 cDNA Rat 大鼠 HMGN2 基因全長ORF克隆
DNPEP cDNA Rat 大鼠 DNPEP 基因全長ORF克隆
PSMC3 cDNA Rat 大鼠 PSMC3 基因全長ORF克隆
GPR107 cDNA Rat 大鼠 GPR107 基因全長ORF克隆
NR1H3 cDNA Rat 大鼠 NR1H3 基因全長ORF克隆
HSPA5 cDNA Rat 大鼠 HSPA5 基因全長ORF克隆
ARF4 cDNA Rat 大鼠 ARF4 基因全長ORF克隆
SLC25A39 cDNA Rat 大鼠 SLC25A39 基因全長ORF克隆
ETF1 cDNA Rat 大鼠 ETF1 基因全長ORF克隆
NOSTRIN cDNA Rat 大鼠 NOSTRIN 基因全長ORF克隆
BCAP31 cDNA Rat 大鼠 BCAP31 基因全長ORF克隆
COPS3 cDNA Rat 大鼠 COPS3 基因全長ORF克隆
PRL4A1 cDNA Rat 大鼠 PRL4A1 基因全長ORF克隆
OAT cDNA Rat 大鼠 OAT 基因全長ORF克隆
CDKN2AIPNL cDNA Rat 大鼠 CDKN2AIPNL 基因全長ORF克隆
KCNA10 cDNA Rat 大鼠 KCNA10 基因全長ORF克隆
MYL12A cDNA Rat 大鼠 MYL12A 基因全長ORF克隆
FGG cDNA Rat 大鼠 FGG 基因全長ORF克隆
TRIP4 cDNA Rat 大鼠 TRIP4 基因全長ORF克隆
KRT15 cDNA Rat 大鼠 KRT15 基因全長ORF克隆
ERAP1 cDNA Rat 大鼠 ERAP1 基因全長ORF克隆
MCM7 cDNA Rat 大鼠 MCM7 基因全長ORF克隆
METTL1 cDNA Rat 大鼠 METTL1 基因全長ORF克隆
NSDHL cDNA Rat 大鼠 NSDHL 基因全長ORF克隆
SELENBP1 cDNA Rat 大鼠 SELENBP1 基因全長ORF克隆
STRADA cDNA Rat 大鼠 STRADA 基因全長ORF克隆
TMEM55A cDNA Rat 大鼠 TMEM55A 基因全長ORF克隆
HADH cDNA Rat 大鼠 HADH 基因全長ORF克隆
GPD1 cDNA Rat 大鼠 GPD1 基因全長ORF克隆
GDI1 cDNA Rat 大鼠 GDI1 基因全長ORF克隆
VPS36 cDNA Rat 大鼠 VPS36 基因全長ORF克隆
LRRC57 cDNA Rat 大鼠 LRRC57 基因全長ORF克隆
SIRT2 cDNA Rat 大鼠 SIRT2 基因全長ORF克隆
PLSCR4 cDNA Rat 大鼠 PLSCR4 基因全長ORF克隆
LECT1 cDNA Rat 大鼠 LECT1 基因全長ORF克隆
ARF2 cDNA Rat 大鼠 ARF2 基因全長ORF克隆
TUBB3 cDNA Rat 大鼠 TUBB3 基因全長ORF克隆
TTC9C cDNA Rat 大鼠 TTC9C 基因全長ORF克隆
RFC5 cDNA Rat 大鼠 RFC5 基因全長ORF克隆
RAC2 cDNA Rat 大鼠 RAC2 基因全長ORF克隆
KRT14 cDNA Rat 大鼠 KRT14 基因全長ORF克隆
