上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-06-08 11:49:36瀏覽次數(shù):426
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公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商,提供 人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞;293 Ad5
的報價,咨詢,稱技術(shù)服務(wù),咨詢選購。
細胞名稱 人原胚腎轉(zhuǎn)化細胞;293 Ad5
形態(tài)特性 上皮樣;多角
生長特性 貼壁生長
特征特性 293細胞是由腺病毒5型(Ad5)DNA轉(zhuǎn)化原代人胚腎獲得的*細胞系。該細胞對人的腺病毒尤其敏感,能受納高水平的腺病毒DNA。含有5型腺病毒的基因,且能高效表達。此外,293細胞的染色體數(shù)目以亞三倍體(hypotriploid)占多數(shù),主流數(shù)為64條(30%),高倍體為4.2%。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 1:3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C35
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR STR鑒定
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類 培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境:首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境,即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。
2、營養(yǎng)物質(zhì):細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。
3、溫度和pH:細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2~7.4。
4、氣體環(huán)境:培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2,O2是細胞代謝所必需的,CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時,通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶,將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
pH:………………………7.90~8.10 (25°C)
用途及描述:科研試劑
儲存條件:18~25°C避光防潮密閉干燥。
中文名稱:TB培養(yǎng)基(Terrific Broth)
英文名字:Terrific Broth
物理性狀及指標:
組分:……………………酪蛋白消化物:12.0 g,酵母浸出物:24.0 g,K2HPO4:9.4 g,KH2PO4:2.2 g
簡介:用于大腸桿菌分子遺傳菌株的制備,支持更高的細胞密度增加質(zhì)粒的產(chǎn)出。
用途及描述:科研試劑,廣泛應(yīng)用于分子生物學。用于大腸桿菌的生存和增殖;微生物實驗。
儲存條件:18~25°C,避光防潮密閉干燥。
中文名稱:變旋酶(比活度:> 50 U/mg,BC)
英文名字:Mutarotase from Pig Kidney
物理性狀及指標:
外觀:……………………50%甘油的中性磷酸鹽緩沖液
活性:……………………> 50 U/mg
用途及描述:科研試劑,生化試劑。
儲存條件:-15~-20℃,避光防潮密閉干燥。
注意:我司產(chǎn)品為非無菌包裝,若用于細胞培養(yǎng),請?zhí)崆白鲱A(yù)處理,除去熱原細菌,否則會導(dǎo)致染菌。以上數(shù)據(jù)僅供參考交流之用。
變旋酶(比活度:> 50 U/mg,BC)的溶解性,變旋酶(比活度:> 50 U/mg,BC)在水中的溶解性,變旋酶(比活度:> 50 U/mg,BC)在生理鹽水中的溶解性,變旋酶(比活度:> 50 U/mg,BC)在PBS緩沖液中的溶解性,變旋酶(比活度:> 50 U/mg,BC)在DMSO、乙醇等有機溶劑中的溶解性,變旋酶(比活度:> 50 U/mg,BC)在細胞實驗方面的應(yīng)用,變旋酶(比活度:> 50 U/mg,BC)在大鼠等動物實驗方面的應(yīng)用
中文名稱:丙烯葡聚糖凝膠S-200 HR
英文名字:Sephacryl S-200 HR
中文名稱:丙烯葡聚糖凝膠S-400 HR
英文名字:Sephacryl S-400 HR
中文名稱:菠羅凝集素樹脂
英文名字:Immobilized Jacalin (Settled Resin)
用途及描述:科研試劑,蛋白純化與層析
儲存條件: 2~8°C
中文名稱:純水(HPLC grade)
英文名字:Purifed Water (HPLC grade)
產(chǎn)品描述
本產(chǎn)品為高純度水,指化學純度*的水,其主要應(yīng)用在生物、化學化工、冶金、宇航、電力等領(lǐng)域。
產(chǎn)品優(yōu)勢
本產(chǎn)品過超純水儀純化(18M Ω .cm)并過0.22μm過濾的水,符合HPLC等一系列實驗的要求。
保存條件
室溫保存1年;
注意事項
為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
中文名稱:低熔點瓊脂糖;具有低凝膠溫度的瓊脂糖
英文名字:Agarose, low gelling temperature
物理性狀及指標:
外觀:………………………………………………………………白色粉末
溶解性:……………………………………………………………本品1g溶解于100ml水中,膠液透明
干燥失重:…………………………………………………………≤10%
灰分:………………………………………………………………≤0.5%
硫酸根:……………………………………………………………≤0.1%
凝膠強度(Gel strength,1.0%):……………………………≥250 g/cm2
融膠溫度(Melting point,1.5%):……………………………≤65℃
凝膠溫度(Gelling point,1.5%):……………………………27-31℃
電內(nèi)滲(Eeo –mr):………………………………………………≤ 0.09
DNA酶、RNA酶、蛋白酶(DNase、Rnase& Protease): 不得檢出
用途及描述:科研試劑,低熔點瓊脂糖是過化學修飾的瓊脂糖,具有更高的篩過特性,更透明。是理想的DNA和RNA電泳產(chǎn)品,也適合組織培養(yǎng)細胞的克隆和病毒空斑分析。多糖鏈上引入羥乙基、甲氧基等基團后的瓊脂糖。由于其能在30℃左右成膠,約65℃熔化,熔化溫度低于大多數(shù)雙鏈DNA熔點。利用低熔點瓊脂糖的這種性質(zhì)可以從凝膠中回收天然形式的DNA。本公司的瓊脂糖凝膠強度高、彈性好、硫酸根低、電滲低,透明度高等優(yōu)點。
儲存條件:18~25℃,避光防潮密閉干燥。
中文名稱:鮭魚精DNA