上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間:2017-06-09 09:25:01瀏覽次數(shù):355
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細(xì)胞名稱 人胰腺癌細(xì)胞;PANC-1
形態(tài)特性 上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞系來(lái)源于人的胰腺癌導(dǎo)管組織。1973年由Lieber 等建立。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 20%FBS
傳代方法 1:3傳代;3-4天一次
傳代情況 PN8
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 熒光法(-)
STR Amelogenin:X;D8S1179:14, 15;D21S11:28;D7S820:8, 10;CSF1PO:10, 12;D3S1358:17;TH01:7,8;D13S317:11;D16S539:11;D2S1338:23,24;D19S433:11,16;vWA:15;THOX:8,11;D18S51:12;D5S818:11,13;FGA:21。
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類人胰腺癌細(xì)胞;PANC-1
實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后,將動(dòng)物處死,用剪刀剪開(kāi)皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來(lái)回搓干凈。剪開(kāi)兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來(lái)回烤一下,以助染色體更好分散和展開(kāi)。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
人血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)elisa試劑盒 Human alpha-granular membrane protein, GMP-140 Elisa Kit 96T/48T
人末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)elisa試劑盒 Human terminal complement complex C5b-9, TCC C5b-9 Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體蛋白4(C4)elisa試劑盒 Human Complement 4, C4 Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體蛋白3(C3)elisa試劑盒 Human Complement 3, C3 Elisa Kit 96T/48T
人Ⅱ(FⅡ)elisa試劑盒 Human coagulation factor Ⅱ, FⅡ Elisa Kit 96T/48T
人類白細(xì)胞抗原B27(HLA-B27)elisa試劑盒 Human leucocyte antigen B27, HLA-B27 Elisa Kit 96T/48T
人結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)elisa試劑盒 Human Haptoglobin, Hpt/HP Elisa Kit 96T/48T
人血清總補(bǔ)體(CH50)elisa試劑盒 Human 50% complement hemolysis, CH50 Elisa Kit 96T/48T
人過(guò)敏毒素/補(bǔ)體片斷4(C4a)elisa試劑盒 Human Complement fragment 4a, C4a Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體片斷5a(C5a)elisa試劑盒 Human Complement fragment 5a, C5a Elisa Kit 96T/48T
人補(bǔ)體片斷3a(C3a)elisa試劑盒 Human Complement fragment 3a, C3a Elisa Kit 96T/48T
人Ⅷ相關(guān)抗原(Ⅷ-Ag)elisa試劑盒 Human coagulation factor Ⅷ related antigen, FⅧ-Ag Elisa Kit 96T/48T
人Ⅸ(FⅨ)elisa試劑盒 Human coagulation factor Ⅸ, FⅨ Elisa Kit 96T/48T
人Ⅹ(FⅩ)elisa試劑盒 Human coagulation factor Ⅹ, FⅩ Elisa Kit 96T/48T
人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子(VWF)elisa試劑盒 Human von Willebrand Factor, vWF Elisa Kit 96T/48T
人纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)elisa試劑盒 Human plasmin-antiplasmin complex, PAP Elisa Kit 96T/48T
人抗復(fù)合物(TAT)elisa試劑盒 Human thrombin-antithrombin complex, TAT Elisa Kit 96T/48T
人抗受體(ATR)elisa試劑盒 Human anti-thrombin receptor, ATR Elisa Kit 96T/48T
人受體(TR)elisa試劑盒 Human thrombin receptor, TR Elisa Kit 96T/48T
人第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)elisa試劑盒 Human Factor Ⅷ-related Antigen, FⅧAg Elisa Kit 96T/48T
人血纖蛋白原(Fbg)elisa試劑盒 Human Fibrinogen, Fbg Elisa Kit 96T/48T
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/HLAⅠ)elisa試劑盒 Human major histocompatibility complex Ⅰ, MHCⅠ/HLAⅠ Elisa Kit 96T/48T
人抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)elisa試劑盒 Human Anti-Thrombin Ⅲ, AT-Ⅲ Elisa Kit 96T/48T
人血栓前體蛋白(TpP)elisa試劑盒 Human thrombus precursor protein, TpP Elisa Kit 96T/48T
人淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)elisa試劑盒 Human lymphocyte function associated antigen 3, LFA-3 Elisa Kit 96T/48T
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)elisa試劑盒 Human major histocompatibility complex Ⅲ, MHCⅢ/HLA-Ⅲ Elisa Kit 96T/48T
人主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/HLA-Ⅱ)elisa試劑盒 Human major histocompatibility complex Ⅱ, MHCⅡ/HLA-Ⅱ Elisa Kit 96T/48T
人載脂蛋白A1(apo-A1)elisa試劑盒 Human apoprotein A1, apo-A1 Elisa Kit 96T/48T
人載脂蛋白B100(apo-B100)elisa試劑盒 Human apoprotein B100, apo-B100 Elisa Kit 96T/48T
人白血病抑制因子受體(LIFR)elisa試劑盒 Human leukemia inhibitory factor receptor, LIFR Elisa Kit 96T/48T
A(IgA)elisa試劑盒 Human Immunoglobulin A, IgA Elisa Kit 96T/48T
G(IgG)elisa試劑盒 Human Immunoglobulin G, IgG Elisa Kit 96T/48T
M(IgM)elisa試劑盒 Human Immunoglobulin M, IgM Elisa Kit 96T/48T
人纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)elisa試劑盒 Human plasminogen activator inhibitor 1, PAI-1 Elisa Kit 96T/48T