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公司是*的ATCC細胞供應(yīng)商，提供人結(jié)直腸腺癌細胞；HT-29
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細胞名稱 人結(jié)直腸腺癌細胞；HT-29
形態(tài)特性  上皮樣；多角
生長特性 貼壁生長
特征特性  該細胞是1964年由Fogh J用移植培養(yǎng)方法和含15%FBS的F12培養(yǎng)液從原發(fā)性腫瘤分離的。近來，已建株的培養(yǎng)細胞用含血清的McCoy's 5a培養(yǎng)基培養(yǎng)。 該細胞系在裸鼠中成瘤，也能在類固醇處理的地鼠中成瘤。該細胞可合成IgA、CEA、TGFβ結(jié)合蛋白和黏液素；表達受體，但沒有檢測到血漿酶原活性；不表達CD4，但細胞表面表達半乳糖神經(jīng)酰胺（HIV的可能替代受體）。該細胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos陽性；p53基因過表達，并且在273位密碼子處發(fā)
培養(yǎng)條件  RPMI 1640 (w/o Hepes)  15%NBS
傳代方法  1：3傳代；3-4天一次
傳代情況 不詳
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 熒光法（-）
STR  Amelogenin：X；D8S1179：10, 16；D21S11：29,30；D7S820：10；CSF1PO：11, 12；D3S1358：15, 17；TH01：6, 9；D13S317：11, 12；D16S539：11, 12；D2S1338：19, 23；D19S433：14；vWA：17, 19；THOX：8, 9；D18S51：13；D5S818：11, 12；FGA：20, 22。
同工酶
染色體  68-72

使用權(quán)限 A類培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無菌、無毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細胞處于無菌、無毒的環(huán)境，即對培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進行無菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過程中的污染。

2、營養(yǎng)物質(zhì)：細胞體外培養(yǎng)所需營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動物的體溫相近。多數(shù)細胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進行細胞培養(yǎng)時，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人多免疫球蛋白受體(poly-IgR)elisa試劑盒 polyimmunoglobulinreceptor, poly-IgR Elisa Kit 96T/48T
人血紅蛋白晚期糖基化終末產(chǎn)物(Hb-AGE)elisa試劑盒 Human hemoglobin-advanced glycosylation end products, Hb-AGE Elisa Kit 96T/48T
人表免疫球蛋白A(mIgA)elisa試劑盒 Human membrane IgA, mIgA Elisa Kit 96T/48T
j鏈(Ig-j)elisa試劑盒 Human immunoglubin joining chain, Ig-j Elisa Kit 96T/48T
人血紅蛋白β亞基(HB-β)elisa試劑盒 Human β-subunits of hemoglobin, HB-β Elisa Kit  96T/48T
人分泌型免疫球蛋白A(SIgA)elisa試劑盒 Human secretory immunoglobulin A, SIgA Elisa Kit  96T/48T
人活化Ⅻ(FⅫa)elisa試劑盒 Human activated coagulation factor Ⅻ, FⅫa Elisa Kit 96T/48T
人游離蛋白S(FP-S)elisa試劑盒 Human Free Protein S, FP-S Elisa Kit 96T/48T
人異常原(APT)elisa試劑盒 Human Abnormal prothrombin, APT Elisa Kit 96T/48T
人循環(huán)免疫復(fù)合物(CIC)elisa試劑盒 Human circulating immune complex, CIC Elisa Kit 96T/48T
人血小板相關(guān)抗體IgM(PA-IgM)elisa試劑盒 Human Plaet associated antibody, PA-IgM Elisa Kit 96T/48T
人血纖肽/纖維蛋白肽A(FPA)elisa試劑盒 Human fibrinopeptide A, FPA Elisa Kit 96T/48T
人纖溶酶原(Plg)elisa試劑盒 Human Plasminogen, Plg Elisa Kit 96T/48T
人細胞毒性T淋巴細胞相關(guān)抗原4(CTLA-4/CD152)elisa試劑盒 Human cytotoxic T lymphocyte associated antigen 4, CTLA-4 Elisa Kit 96T/48T

輕鏈lambda(λ-IgLC)elisa試劑盒 Human lambda immunoglobulin light chain, λ-IgLC Elisa Kit 96T/48T
人肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物(pMHC)elisa試劑盒 Human peptide major histocompatibility complex, pMHC Elisa Kit 96T/48T
人皮膚淋巴細胞相關(guān)抗原(CLA)elisa試劑盒 Human cutaneous lymphocyte-associated antigen, CLA Elisa Kit 96T/48T
人血栓調(diào)節(jié)蛋白復(fù)合物(T-TM)elisa試劑盒 Human thrombinthrombomodulin compound, T-TM Elisa Kit 96T/48T
人溶血補體(Hc)elisa試劑盒 Human Hemolytic complement, Hc Elisa Kit 96T/48T
人T細胞受體(TCR)elisa試劑盒 Human T cell receptor, TCR Elisa Kit 96T/48T
人狼瘡抗凝抗體(LAC/LA)elisa試劑盒 Human lupus anticoagulant, LAC/LA Elisa Kit 96T/48T
人可溶性血纖蛋白單體復(fù)合物(SFMC)elisa試劑盒 Human soluble fibrin monomer complex, SFMC Elisa Kit 96T/48T
人血清白蛋白(HSA)elisa試劑盒 Human sreum albumin, HSA Elisa Kit 96T/48T
人2,3Dinor血栓烷B2(2,3-dinor-TXB2)elisa試劑盒 Human 2, 3-dinor thromboxane B2, 2, 3-dinor-TXB2 Elisa Kit 96T/48T
人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)elisa試劑盒 Human 11-dehydro-thromboxane B2, 11-DH-TXB2 Elisa Kit 96T/48T
人血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)elisa試劑盒 Human thrombomodulin, TM Elisa Kit  96T/48T
人纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)elisa試劑盒 Human Thrombin activatable fibrinolysis inhibitor, TAFI Elisa Kit 96T/48T
人血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)elisa試劑盒 Human plaet membrane glycoprotein ⅡbⅢa, GP-ⅡbⅢa Elisa Kit 96T/48T
人血小板反應(yīng)蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)elisa試劑盒 Human thrombospondin 1, TSP-1 Elisa Kit 96T/48T