上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時(shí)間:2017-06-09 09:40:10瀏覽次數(shù):405
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細(xì)胞名稱 小鼠血細(xì)胞;WEHI-3 [WEHI3]
形態(tài)特性 圓形
生長(zhǎng)特性 懸浮生長(zhǎng);部分細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)
特征特性 該細(xì)胞表達(dá)補(bǔ)體C3受體(C3R),產(chǎn)生、粒細(xì)胞集落刺激活性(CSA)、IL-3。4 ng/ml LPS可以抑制WEHI-3的生長(zhǎng),更高濃度可以阻斷其生長(zhǎng);30~40 μg/ml右旋葡聚糖也可抑制其生長(zhǎng);可以吞噬乳膠顆粒,但無(wú)毒性;可吞噬酵母聚糖和BCG,并阻斷該細(xì)胞的生長(zhǎng);該細(xì)胞僅表現(xiàn)出微弱的抗體依賴的細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒反應(yīng)。鼠痘病毒陰性。
培養(yǎng)條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法 細(xì)胞密度維持在2×105~ 2×106/ml,每2~3天換液1次。
傳代情況 C5
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 70~78
使用權(quán)限 A類(lèi)小鼠血細(xì)胞;WEHI-3 [WEHI3]
實(shí)驗(yàn)方法和步驟
(一) 前處理 用臺(tái)稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動(dòng)物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時(shí)后,將動(dòng)物處死,用剪刀剪開(kāi)皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來(lái)回搓干凈。剪開(kāi)兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細(xì)胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長(zhǎng)一點(diǎn)時(shí)間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時(shí)間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細(xì)胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細(xì)胞均勻分散,在酒精燈火焰上來(lái)回烤一下,以助染色體更好分散和展開(kāi)。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細(xì)觀察兩棲類(lèi)染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項(xiàng):
1.收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們。
2.收到細(xì)胞先不開(kāi)瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)(視細(xì)胞密度而定)穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收細(xì)胞時(shí)就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細(xì)胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細(xì)胞在運(yùn)輸過(guò)程中是否有污染情況。作為我方進(jìn)行銷(xiāo)售依據(jù)。
3.由于細(xì)胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運(yùn)輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細(xì)胞后一周內(nèi)的細(xì)胞狀態(tài),故客戶需要售后時(shí)需出示收到細(xì)胞的時(shí)間證明及客戶提供收貨時(shí)間和發(fā)現(xiàn)問(wèn)題后客服人員溝通的時(shí)間證明,期間間隔時(shí)間不能大于7天。
4.所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
人己糖激酶3(HK3)elisa試劑盒 human hexokinase 3, HK3 Elisa Kit 96T/48T
人血小板型磷酸果糖激酶(PFKP)elisa試劑盒 human phosphofructokinase-plaet, PFKP Elisa Kit 96T/48T
人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)elisa試劑盒 human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase Elisa Kit 96T/48T
人尿苷二磷酸葡萄糖神經(jīng)酰胺葡萄糖基轉(zhuǎn)移酶(UGCG)elisa試劑盒 human UDP-glucose ceramide glucosyltransferase Elisa Kit 96T/48T
人凋亡相關(guān)半肽酶4(Casp4)elisa試劑盒 human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase, Casp4 Elisa Kit 96T/48T
人吡哆醛/吡哆醇6激酶(PDXK)elisa試劑盒 human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase, Casp4 Elisa Kit 96T/48T
人二氫嘧啶酶樣2(DPYSL2)elisa試劑盒 human dihydropyrimidinase-like 2, DPYSL2 Elisa Kit 96T/48T
人血清/糖皮質(zhì)激素調(diào)節(jié)激酶2(GSK2)elisa試劑盒 human serum/glucocorticoid regulated kinase 2, GSK2 ISA KIT 96T/48T
人絲裂原活化蛋白激酶激酶6(MKK6)elisa試劑盒 human mitogen activated protein kinase kinase 6, MKK6 Elisa Kit 96T/48T
人吡哆醛/吡哆醇6磷酸酶(PDXP)elisa試劑盒 human pyridoxal/pyridoxine vitamin B6-phosphatase, PDXP Elisa Kit 96T/48T
人T細(xì)胞特異性鳥(niǎo)苷三磷酸酶(Tgtp)elisa試劑盒 Human T-cell specific GTPase, Tgtp Elisa Kit 96T/48T
人法尼基二磷酸法尼基轉(zhuǎn)移酶1(FDFT1)elisa試劑盒 Human farnesyl-diphosphate farnesyltransferase 1, FDFT1 Elisa Kit 96T/48T
人D-乳酸脫氫酶(D-LDH) elisa試劑盒 Human D-Lactate Dehydrogenase, D-LDH Elisa Kit 96T/48T
人α1抗(α1-AT)elisa試劑盒 Human α1-Antitrypsin, α1-AT Elisa Kit 96T/48T
人1(KLK 1)elisa試劑盒 Human Kallikrein 1, KLK 1 Elisa Kit 96T/48T
人磷酸化乙酰(PaCoA)elisa試劑盒 Human Phosphorylated acetyl CoA, PaCoA Elisa Kit 96T/48T
人磷酸甘油酸變位酶2(PGAM2)elisa試劑盒 Human phosphoglycerate mutase 2, PGAM2 Elisa Kit 96T/48T
人前列腺素D合成酶(PTGDS)elisa試劑盒 Human Prostaglandin D synthase, PTGDS Elisa Kit 96T/48T
人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)elisa試劑盒 Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like 1, PPIL1 Elisa Kit 96T/48T
人肽酰脯氨酰異構(gòu)酶(親環(huán)蛋白)樣1(PPIL1)elisa試劑盒 Human peptidylprolyl isomerase(cyclophilin)-like 1, PPIL1 Elisa Kit 96T/48T
人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)elisa試劑盒 Human mitogen-activated protein kinase-activated protein kinase 3, MAPKAPK3 Elisa Kit 96T/48T
人血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)elisa試劑盒 Human Angiotensin Ⅰ Converting Enzyme, ACEⅠ Elisa Kit 96T/48T
人(AP)elisa試劑盒 Human Aprotinin, AP Elisa Kit 96T/48T
人胱天蛋白酶12(Casp-12)elisa試劑盒 Human Caspase 12, Casp-12 Elisa Kit 96T/48T
人胱天蛋白酶12(Casp-12)elisa試劑盒 Human Caspase 12, Casp-12 Elisa Kit 96T/48T
人蛋白激酶A(PKA)elisa試劑盒 Human Protein kinase A, PKA Elisa Kit 96T/48T
人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)elisa試劑盒 Human A Disintegrin And Metalloprotease 10, ADAM10 Elisa Kit 96T/48T
人基質(zhì)金屬蛋白酶11(MMP11)elisa試劑盒 Human matrix metalloproteinase 11, MMP11 Elisa Kit 96T/48T
人胸苷酸合成酶(TS)elisa試劑盒 Human thymidylate synthetase, TS Elisa Kit 96T/48T
人胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)elisa試劑盒 Human thymidinephosphorylase, TP Elisa Kit 96T/48T