上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-06-09 09:51:46瀏覽次數(shù):354
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細胞名稱 小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6
形態(tài)特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 1972年從C3H小鼠胚胎細胞中分離建立;在同系小鼠體內(nèi)不能成瘤,未發(fā)現(xiàn)自發(fā)轉(zhuǎn)化;化學(xué)制劑很容易引起該細胞發(fā)生轉(zhuǎn)化,建議只用5~15代的細胞。
培養(yǎng)條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 2000cells/cm2傳代;2~3天換液1次。
傳代情況 不詳
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體 69~78
使用權(quán)限 A類小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6
實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊?,故本公司只保證客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
1人鉤端螺旋體IgM(Lebtospira)elisa試劑盒 Human Lebtospira IgM Elisa Kit 96T/48T
人鉤端螺旋體IgG(Lep IgG)elisa試劑盒 Human Leptospira IgG, Lep IgG Elisa Kit 96T/48T
人阿米巴(Amebiasis)elisa試劑盒 Human Amebiasis Elisa Kit 96T/48T
人白喉抗體(Diphtheria Ab)elisa試劑盒 Human Diphtheria antibody Elisa Kit 96T/48T
人囊蟲病抗體(CYT Ab)elisa試劑盒 Human Cysticercosis antybody, CYT Ab Elisa Kit 96T/48T
人布魯氏菌抗體IgG(Brucella Ab IgG)elisa試劑盒 Human Brucella Antibody IgG, Brucella Ab IgG Elisa Kit 96T/48T
人水痘狀皰疹病毒IgM(VZV-IgM)elisa試劑盒 Human Varicella zoster virus IgM, VZV IgM Elisa Kit 96T/48T
人水痘狀皰疹病毒IgG(VZV-IgG)elisa試劑盒 Human Varicella zoster virus IgG, VZV-IgG Elisa Kit 96T/48T
人軍團菌抗體IgA(LP Ab-IgA)elisa試劑盒 Human Legionella antibody IgA, LP Ab-IgA Elisa Kit 96T/48T
人軍團菌抗體IgM(LP Ab-IgM )elisa試劑盒 Human Legionella antibody IgM, LP Ab-IgM Elisa Kit 96T/48T
人軍團菌抗體IgG(LP Ab-IgG)elisa試劑盒 Human Legionella antibody IgG, LP Ab-IgG Elisa Kit 96T/48T
人腮腺炎病毒IgM elisa試劑盒 Human paramyxovirus parotitis IgM Elisa Kit 96T/48T
人腮腺炎病毒IgG elisa試劑盒 Human paramyxovirus parotitis IgG Elisa Kit 96T/48T
人EB病毒IgM(EBv IgM)elisa試劑盒 Human epstein-barr virus IgM, EBv IgM Elisa Kit 96T/48T
人EB病毒IgA(EBv IgA)elisa試劑盒 Human epstein-barr virus IgA, EBv IgA Elisa Kit 96T/48T
人EB病毒IgG(EBv IgG)elisa試劑盒 Human epstein-barr virus IgG, EBv IgG Elisa Kit 96T/48T
人利什曼原蟲抗體(Leishimaria Ab)elisa試劑盒 Human Leishimaria antibody Elisa Kit 96T/48T
人登革熱抗體(DF-Ab)elisa試劑盒 Human dengue fever antibody, DF Elisa Kit 96T/48T
人流感病毒抗體IgG(FLU)elisa試劑盒 Human Influenza viruses IgG, FLU Elisa Kit 96T/48T
人腺病毒IgM(ADV-IgM)elisa試劑盒 Human Adenovirus IgM, ADV-IgM Elisa Kit 96T/48T
人腺病毒IgG(ADV-IgG)elisa試劑盒 Human Adenovirus IgG, ADV-IgG Elisa Kit 96T/48T
人輪狀病毒(RV)IgM elisa試劑盒 Human Rotavirus, RV IgM Elisa Kit 96T/48T
人艾柯病毒IgM(ECHO IgM)elisa試劑盒 human EchoVirus IgM, ECHO IgM Elisa Kit 96T/48T
人抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV)elisa試劑盒 Human anti-respiratory syncytial virus antibody, RSV Elisa Kit 96T/48T
人麻疹病毒IgM(MV IgM)elisa試劑盒 Human measlesvirus IgM, MV IgM Elisa Kit 96T/48T
人柯薩奇病毒IgM(Cox V-IgM)elisa試劑盒 Human Coxsackie virus IgM, Cox V-IgM Elisa Kit 96T/48T
人柯薩奇病毒IgG(Cox V-IgG)elisa試劑盒 Human Coxsackie virus IgG, Cox V-IgG Elisa Kit 96T/48T
人結(jié)核菌桿抗體IgG(TB-Ab IgG)elisa試劑盒 Human tuberculosis antibody IgG, TB-Ab IgG Elisa Kit 96T/48T
人瘢痕性天皰瘡抗體(CP)elisa試劑盒 Human cicatricial Pemphigoid, CP Elisa Kit 96T/48T
人乙型肝炎病毒前S2抗體(HBV preS2Ab)elisa試劑盒 human hepatitis B virus, HBV preS2Ab Elisa Kit 96T/48T
人乙型肝炎病毒前S2抗原(HBV preS2Ag)elisa試劑盒 human hepatitis B virus, HBV preS2Ag Elisa Kit 96T/48T
人庚型肝炎病毒IgM(HGV-IgM)elisa試劑盒 Human Hepatitis G virus IgG, HGV-IgG Elisa Kit 96T/48T
人輸血傳播病毒/辛型肝炎病毒((TTV)elisa試劑盒 human transfusion transmitted virus, TTV Elisa Kit 96T/48T
人戊型肝炎病毒IgM(HEV-IgM)elisa試劑盒 Human Hepatitis D virus IgM, HDV IgM Elisa Kit 96T/48T
人戊型肝炎病毒IgG(HEV-IgG)elisa試劑盒 human hepatitis E virus IgG, HEV-IgG Elisa Kit 96T/48T
人丁型肝炎IgM(HDV IgM)elisa試劑盒 Human Hepatitis D virus IgM, HDV IgM Elisa Kit 96T/48T
人丁型肝炎IgG(HDV IgG)elisa試劑盒 human Hepatitis D virus IgG, HDV IgG Elisa Kit 96T/48T
人丙型肝炎IgM(HCV-IgM)elisa試劑盒 Human Hepatitis C virus IgM, HCV-IgM Elisa Kit 96T/48T
人丙型肝炎IgG(HCV-IgG)elisa試劑盒 Human Hepatitis C virus IgG, HCV-IgG Elisa Kit 96T/48T