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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞；MFC-GFP
的報(bào)價(jià)，咨詢，稱技術(shù)服務(wù)，咨詢選購(gòu)。
細(xì)胞名稱 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠前胃癌細(xì)胞；MFC-GFP
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  轉(zhuǎn)染pEGFP-N1，穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白。
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS；G418 200ug/ml
傳代方法  1:3傳代；2~3天1次。
傳代情況 P5
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

培養(yǎng)需要滿足以下條件
1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。

2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
factor, EG-VEGF Elisa Kit  96T/48T
人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CNTF)elisa試劑盒 Human Ciliary Neurotrophic Factor, CNTF Elisa Kit  96T/48T
人CD30分子(CD30)elisa試劑盒 Human Cluster of differentiation 30, CD30 Elisa Kit 96T/48T
人CXC趨化因子受體1(CXCR1)elisa試劑盒 Human CXC-chemokine receptor 1, CXCR1 Elisa Kit 96T/48T
人XC趨化因子受體1(XCR1)elisa試劑盒 Human XC-chemokine receptor 1, XCR1 Elisa Kit 96T/48T
人二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC/CCL21)elisa試劑盒 Human secondary lymphoid-tissue chemokine, SLC Elisa Kit 96T/48T
人E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)elisa試劑盒 Human E-Cadherin, E-Cad Elisa Kit  96T/48T
人腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(BDNF)elisa試劑盒 Human Brain derived neurotrophic facor, BDNF Elisa Kit 96T/48T
人白細(xì)胞活化黏附因子(ALCAM)elisa試劑盒 Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule, ALCAM Elisa Kit 96T/48T
人活化素A(ACV-A)elisa試劑盒 Human Activin A, ACV-A Elisa Kit 96T/48T
人神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白1(NRG-1)elisa試劑盒 human Neuregulin 1, NRG-1 Elisa Kit 96T/48T
人心鈉肽(ANP)elisa試劑盒 Human Atrial Natriuretic Peptide, ANP Elisa Kit  96T/48T
人多巴胺D2受體(D2R)elisa試劑盒 Human dopamine D2 receptor, D2R Elisa Kit 96T/48T
人內(nèi)*肽-2(EM-2)elisa試劑盒 Human endomorphin-2, EM-2 Elisa Kit 96T/48T
人α-內(nèi)*肽(α-EP)elisa試劑盒 Human α-Endomorphin, α-EP Elisa Kit 96T/48T
人抑制素(INH)elisa試劑盒 Human Inhibin, INH Elisa Kit  96T/48T
人神經(jīng)元凋亡抑制蛋白(NAIP)elisa試劑盒 Human neuronal apoptosis inhibitory protein, NAIP Elisa Kit 96T/48T
人食欲素/阿立新B(OX-B)elisa試劑盒 Human Orexin B, OX-B Elisa Kit 96T/48T
人促睡眠肽(DSIP)elisa試劑盒 Human delta sleep-inducing peptide, DSIP Elisa Kit 96T/48T
人6-羥多巴胺(6-OHDA)elisa試劑盒 Human 6-hydroxydopamine, 6-OHDA Elisa Kit 96T/48T
人心納素(ANF)elisa試劑盒 Human atrial natriuretic factor, ANF Elisa Kit 96T/48T
人神經(jīng)髓鞘蛋白(p2)elisa試劑盒 Human myelin protein 2, p2 Elisa Kit 96T/48T
人*加壓素(AVP)elisa試劑盒 Human arginine vasopressin, AVP Elisa Kit 96T/48T
人垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)elisa試劑盒 Human pituitary adenylate cyclase activating polypeptide, PACAP Elisa Kit 96T/48T
人微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)elisa試劑盒 Human microtubule-associated protein 2, MAP-2 Elisa Kit 96T/48T
人神經(jīng)絲蛋白(NF)elisa試劑盒 Human neurofilament protein, NF Elisa Kit 96T/48T
人利鉀尿肽(KP)elisa試劑盒 Human kaliuretic peptide, KP Elisa Kit 96T/48T
人神經(jīng)降壓素(NT)elisa試劑盒 Human Neurotensin, NT Elisa Kit 96T/48T