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公司是*的ATCC細(xì)胞供應(yīng)商，提供綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細(xì)胞；U14-GFP
的報(bào)價(jià)，咨詢(xún)，稱(chēng)技術(shù)服務(wù)，咨詢(xún)選購(gòu)。
細(xì)胞名稱(chēng) 綠色熒光蛋白標(biāo)記小鼠子細(xì)胞；U14-GFP
形態(tài)特性  上皮樣
生長(zhǎng)特性 貼壁生長(zhǎng)
特征特性  轉(zhuǎn)染pEGFP-N1，穩(wěn)定表達(dá)綠色熒光蛋白。
培養(yǎng)條件  DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS；G418 200ug/ml
傳代方法  1:3傳代；2~3天1次。
傳代情況 P2
凍存條件  基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR  -
同工酶
染色體

使用權(quán)限 A類(lèi)培養(yǎng)需要滿(mǎn)足以下條件
1、無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境：首先應(yīng)保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境，即對(duì)培養(yǎng)液和所有的培養(yǎng)用具進(jìn)行無(wú)菌處理。通常還要在培養(yǎng)液中添加一定量的抗生素以防培養(yǎng)過(guò)程中的污染。

2、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)：細(xì)胞體外培養(yǎng)所需營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同，需要有葡萄糖、氨基酸、促生長(zhǎng)因子、無(wú)機(jī)鹽、微量元素等。通常還需加入血清、血漿等一些天然成分。

3、溫度和pH：細(xì)胞體外培養(yǎng)的適宜溫度一般與動(dòng)物的體溫相近。多數(shù)細(xì)胞生存的適宜pH為7.2～7.4。

4、氣體環(huán)境：培養(yǎng)所需氣體主要有O2和CO2，O2是細(xì)胞代謝所必需的，CO2的主要作用是維持培養(yǎng)液的pH。進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，通常采用培養(yǎng)皿或松蓋培養(yǎng)瓶，將其置于含95%空氣加5% CO2的混合氣體的培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。
操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周?chē)疂n吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
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人正常T細(xì)胞表達(dá)和分泌因子(RANTES/CCL5)elisa試劑盒 Human regulated on activation in normal T-cell expressed and secreted, RANTES Elisa Kit  96T/48T
人P選擇素(P-Selectin/CD62P/GMP140)elisa試劑盒 Human P-Selectin/CD62P/GMP140 Elisa Kit  96T/48T
人血血小板衍生生長(zhǎng)因子AB(PDGF-AB)elisa試劑盒 Human Plaet-Derived Growth Factor AB, PDGF-AB Elisa Kit  96T/48T
人血血小板衍生生長(zhǎng)因子可溶性受體α(PDGFsR-α)elisa試劑盒 Human Plaet-Derived Growth Factor Soluble Receptor α, PDGFsR-α Elisa Kit  96T/48T
人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)elisa試劑盒 Human Neurotrophin 4, NT-4 Elisa Kit  96T/48T
人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)elisa試劑盒 人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)Elisa Kit 96T/48T
人的神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)elisa試劑盒 Human Nerve growth factor, NGF Elisa Kit  96T/48T
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)elisa試劑盒 Human Macrophage Inflammatory Protein-3β, MIP-3β Elisa Kit  96T/48T
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)elisa試劑盒 Human Macrophage Inflammatory Protein-3α, MIP-3α Elisa Kit  96T/48T
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)elisa試劑盒 Human Macrophage Inflammatory Protein-1β, MIP-1β Elisa Kit 96T/48T
人巨噬細(xì)胞炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)elisa試劑盒 Human Macrophage Inflammatory Protein-1α, MIP-
1α Elisa Kit  96T/48T
人巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)elisa試劑盒 Human Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit  96T/48T
人巨噬細(xì)胞來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)elisa試劑盒 Human Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit  96T/48T
人巨噬細(xì)胞集落刺激因子(M-CSF)elisa試劑盒 Human Macrophage Colony-Stimulating Factor, M-CSF Elisa Kit  96T/48T
人單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)elisa試劑盒 Human monocyte chemotactic protein 3, MCP-3 Elisa Kit 96T/48T
人單核細(xì)胞趨化蛋白2(MCP-2/CCL8)elisa試劑盒 Human monocyte chemotactic protein 2, MCP-2 Elisa Kit  96T/48T
人單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)elisa試劑盒 Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and activating factor, MCP-1/MCAF Elisa Kit 96T/48T
人L選擇素(L-Selectin/CD62L)elisa試劑盒 Human L-Selectin Elisa Kit  96T/48T
人白介素9(IL-9)elisa試劑盒 Human Interleukin 9, IL-9 Elisa Kit  96T/48T
人白介素8(IL-8/CXCL8)elisa試劑盒 Human Interleukin 8, IL-8 Elisa Kit  96T/48T
人白介素6(IL-6)elisa試劑盒 Human Interleukin 6, IL-6 Elisa Kit  96T/48T
人白介素-5(IL-5)elisa試劑盒 Human Interleukin 5, IL-5 Elisa Kit  96T/48T
人白介素4(IL-4)elisa試劑盒 Human Interleukin 4, IL-4 Elisa Kit  96T/48T
人白介素3(IL-3)elisa試劑盒 Human Interleukin 3, IL-3 Elisa Kit  96T/48T
人白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ )elisa試劑盒 Human Interleukin 2, IL-2 Elisa Kit  96T/48T
人白介素2可溶性受體α鏈(IL-2sRα/CD25)elisa試劑盒 Human soluble interleukin-2 receptor, IL-2sRα Elisa Kit  96T/48T
人白介素2(IL-2)elisa試劑盒 Human Interleukin 2, IL-2 Elisa Kit  96T/48T
人白介素1α(IL-1α )elisa試劑盒 Human Interleukin 1α, IL-1α Elisa Kit  96T/48T
人白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)elisa試劑盒 Human soluble interleukin-1 receptor Ⅱ, IL-1sRⅡ Elisa Kit  96T/48T
人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)elisa試劑盒 Human soluble interleukin-1 receptor Ⅰ, IL-1sRⅠ Elisa Kit