上海莼試生物技術(shù)有限公司
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更新時間:2017-06-09 10:39:25瀏覽次數(shù):286
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細胞名稱 小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP
形態(tài)特性 梭形,胞突呈分枝狀,常有大小粗細不等的胞突
生長特性 貼壁生長
特征特性 GFP穩(wěn)定表達
培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法
傳代情況
凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養(yǎng)法(-)
STR -
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類小鼠樹突狀細胞肉瘤低轉(zhuǎn)移細胞(綠色熒光蛋白標記);DG6-GFP
實驗方法和步驟
(一) 前處理 用臺稱稱量青蛙或蟾蜍的體重,然后按10微克/克動物體重的劑量,腹腔注射秋水仙素。
(二) 取材 注射4小時后,將動物處死,用剪刀剪開皮膚和肌肉,取出大腿骨和脛骨,剔凈股骨上的肌肉,然后用一小塊紗布來回搓干凈。剪開兩端股骨,用注射器(內(nèi)裝5ml 1% 檸檬酸鈉溶液)緩慢沖洗骨髓細胞到離心管中,經(jīng)平衡后離心8分鐘,速度為1000轉(zhuǎn)/分鐘。
(三) 低滲 吸去上清液,留沉淀物0.2ml,加0.046M KCL 溶液至8 ml 刻度,用吸管沖勻沉淀物,在恒溫水浴(28℃)處理20分鐘或更長一點時間。
(四) 固定 低滲后,以每分鐘1000轉(zhuǎn)速度離心10分鐘。用吸管小心吸去上清液,留0.2ml沉淀物,沖散后沿管壁慢慢加入6ml固定液。 沖勻后靜止固定20分鐘。重復(fù)固定1~2次,離心的速度與時間以上述相同。
(五) 滴片 吸去上清液,留0.2ml沉淀物,加4滴新配的固定液,沖勻沉淀物。從冰箱取出預(yù)先冷凍的載片,每片滴3滴細胞懸液,立即用嘴向載片上吹氣,使細胞均勻分散,在酒精燈火焰上來回烤一下,以助染色體更好分散和展開。 (六) 染色 用10:1 Giemsa染液染色20分鐘(Giemsa原液用PH=6.8磷酸緩沖液稀釋),然后用水沖洗,片干后鏡檢。 (七) 鏡檢 在中倍鏡下找染色體分散好的中期分裂相,轉(zhuǎn)至高倍鏡詳細觀察兩棲類染色體的數(shù)目,屬于大、中、小染色體各有多少條。
注意事項:
1.收到細胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們。
2.收到細胞先不開瓶蓋,瓶身擦拭酒精后放在培養(yǎng)箱靜置2-4小時(視細胞密度而定)穩(wěn)定細胞狀態(tài)。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收細胞時就整體外觀拍一張照片,觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態(tài),100*,200*各一張),觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據(jù)。
3.由于細胞狀態(tài)受環(huán)境、操作和運輸?shù)榷喾矫嬉蛩赜绊懀时竟局槐WC客戶收到細胞后一周內(nèi)的細胞狀態(tài),故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發(fā)現(xiàn)問題后客服人員溝通的時間證明,期間間隔時間不能大于7天。
4.所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。
不均一核糖核蛋白A2/B1(HNRPA2B1)ELISA試劑盒 * ,英文名: HNRPA2B1 ELISA Kit
不均一核核糖核蛋白U(HNRPU)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: HNRPU ELISA Kit
不均一核核糖核蛋白K(HNRPK)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: HNRPK ELISA Kit
補體應(yīng)答基因32(RGC32)ELISA試劑盒 * ,英文名: RGC32 ELISA Kit
補體因子P(CFP)ELISA試劑盒 * ,英文名: CFP ELISA Kit
補體因子H相關(guān)蛋白3(CFHR3)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: CFHR3 ELISA Kit
補體因子B(CFB)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: CFB ELISA Kit
補體受體4(CR4)ELISA試劑盒 * ,英文名: CR4 ELISA Kit
補體受體2(CR2)ELISA試劑盒 * ,英文名: CR2 ELISA Kit
補體成分9(C9)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: C9 ELISA Kit
補體成分8γ(C8γ)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: C8γ ELISA Kit
補體成分8β(C8β)ELISA試劑盒 * ,英文名: C8β ELISA Kit
補體成分7(C7)ELISA試劑盒 * ,英文名: C7 ELISA Kit
補體成分6(C6)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: C6 ELISA Kit
補體成分5a(C5a)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: C5a ELISA Kit
補體成分5(C5)ELISA試劑盒 * ,英文名: C5 ELISA Kit
補體成分4d(C4d)ELISA試劑盒 * ,英文名: C4d ELISA Kit
補體成分4b(C4b)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: C4b ELISA Kit
補體成分4(C4)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: C4 ELISA Kit
補體成分3a受體1(C3aR1)ELISA試劑盒 * ,英文名: C3aR1 ELISA Kit
補體成分3(C3)ELISA試劑盒 * ,英文名: C3 ELISA Kit
補體成分2(C2)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: C2 ELISA Kit
補體成分1s(C1s)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: C1s ELISA Kit
補體成分1r(C1r)ELISA試劑盒 * ,英文名: C1r ELISA Kit
補體成分1q子成分樣蛋白1(C1qL1)ELISA試劑盒 * ,英文名: C1qL1 ELISA Kit
補體成分1q子成分C(C1qC)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: C1qC ELISA Kit
補體成分1q子成分A(C1qA)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: C1qA ELISA Kit
補體C5轉(zhuǎn)化酶(C5c)ELISA試劑盒 * ,英文名: C5c ELISA Kit
補體C3轉(zhuǎn)化酶(C3c)ELISA試劑盒 * ,英文名: C3c ELISA Kit
補體3a(C3a)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: C3a ELISA Kit
補體1抑制因子(C1INH)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: C1INH ELISA Kit
水解酶(BLMH)ELISA試劑盒 * ,英文名: BLMH ELISA Kit
玻璃體蛋白(VIT)ELISA試劑盒 * ,英文名: VIT ELISA Kit
丙酮酸脫氫酶磷酸酶(PDP)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: PDP ELISA Kit
丙酮酸脫氫酶激酶同工酶4(PDK4)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: PDK4 ELISA Kit
丙酮酸脫氫酶β(PDHβ)ELISA試劑盒 * ,英文名: PDHβ ELISA Kit
丙酮酸脫氫酶α(PDHα)ELISA試劑盒 * ,英文名: PDHα ELISA Kit
丙酮酸羧化酶(PC)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: PC ELISA Kit
丙糖磷酸異構(gòu)酶1(TPI1)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: TPI1 ELISA Kit
氨肽酶(AAP)ELISA試劑盒 * ,英文名: AAP ELISA Kit
//半/轉(zhuǎn)運蛋白(ASCT1)ELISA試劑盒 * ,英文名: ASCT1 ELISA Kit
別孕烯醇酮(AP)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: AP ELISA Kit
表皮轉(zhuǎn)酶(TGM3)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: TGM3 ELISA Kit
表皮調(diào)節(jié)素(EREG)ELISA試劑盒 * ,英文名: EREG ELISA Kit
表皮生長因子途徑底物蛋白3(EPN3)ELISA試劑盒 * ,英文名: EPN3 ELISA Kit
表皮生長因子途徑底物蛋白2(EPN2)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: EPN2 ELISA Kit
表皮生長因子途徑底物蛋白1(EPN1)ELISA試劑盒 進口原裝 ,英文名: EPN1 ELISA Kit
表皮生長因子受體2(EGFR2)ELISA試劑盒 * ,英文名: EGFR2 ELISA Kit
表皮膜蛋白3(EMP3)ELISA試劑盒 * ,英文名: EMP3 ELISA Kit
表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白J(SPJ)ELISA試劑盒 進口分裝 ,英文名: SPJ ELISA Kit