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原代細胞VS細胞系：

用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說，從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞，絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。

人子宮內(nèi)膜上皮細胞

商品屬性：

細胞簡介：

人子宮內(nèi)膜上皮分離自子宮組織；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部，膀胱與直腸之間，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時，可以引起子宮脫垂。子宮內(nèi)膜即黏膜，由上皮（屬單層柱狀上皮，有分泌細胞和纖毛細胞二種）和固有膜（由結(jié)締組織構(gòu)成，其內(nèi)有大量的星形細胞，稱為基質(zhì)細胞）組成，子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層，功能層較厚，約占內(nèi)膜厚度的4/5；基底層較薄較致密，約占1/5，功能層可剝脫，而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜上皮細胞主要功能：①子宮內(nèi)膜亦稱子宮黏膜，是指構(gòu)成哺乳類子宮內(nèi)壁的一層；②子宮內(nèi)膜對動情素和孕激素都起反應(yīng)，因此可隨著性周期（發(fā)情周期、月經(jīng)周期）發(fā)生顯著的變化。子宮內(nèi)膜與胚胎附植密切相關(guān)，在生殖生理的研究中占重要地位。在胚胎與母體“對話"的過程中，子宮內(nèi)膜上皮細胞充當了極其重要的角色。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動物子宮壁的內(nèi)層，位于子宮腔面，在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官，子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜上皮細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介：

公司實驗室分離的人子宮內(nèi)膜上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人子宮內(nèi)膜上皮采用膠原酶消化法，結(jié)合上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞一般傳至10代左右，大部分細胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去，存活的細胞一般能夠傳到40-50代，叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機"，這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c，從而可能無限制地傳代下去，稱為細胞系。

也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系，因此，細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞，廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。

細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠糖原合成酶激酶(GSK)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human thioredoxin reductase (xR) ELISA Kit 人硫氧還蛋白還原酶(xR)ELISA試劑盒

Humanindoleamine2,3-dioxygenase,IDOELISAKit 人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISA試劑盒雞血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

載玻片細胞TSH-BETA蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次

MouseE-SelectinELISAKit小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠糖皮質(zhì)激素   英文名稱：   glucocoicoid   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   GC

膠質(zhì)細胞源神經(jīng)營養(yǎng)因子   英文名稱：   glial cell line-derived neuoophic factor   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   GDNF

小鼠生長因子   英文名稱：   growth hormone   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   GH

小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA3   英文名稱：   cardiac muscle anscription factor GATA3   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   GATA3

大鼠蛋白激酶N2(PKN2)ELISA試劑盒 ，英文名： PKN2 ELISA Kit

Na+/H+ exchanger 3 (NHE3) ELISA Kit 人Na+/H+交換體3(NHE3)ELISA試劑盒

Ratsolubleierleukin-2receptor,IL-2sRβELISAkit 大鼠白介素2可溶性受體β鏈(IL-2sRβ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforCyclin-D2ELISAKit大鼠細胞周期素D2規(guī)格：48T/96T

細胞色素P450亞酶CYP2C9(CEC)活性熒光定量檢測試劑盒20次

RatFibrinogen,FbgELISAKit大鼠血纖蛋白原(Fbg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

FIGF重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標簽) Protein

ets1/E26 (E-twenty six 1 0.5mgets1/E26 (E-twenty six 1) Ets轉(zhuǎn)錄因子家族ets1抗原

IL12A & IL12B重組人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

CHEK1 Protein Human 重組人 CHK1 / CHEK1 蛋白 (GST 標簽)

CTSE Protein Mouse 重組小鼠 Cathepsin E / CTSE 蛋白 (His 標簽)

人子宮內(nèi)膜上皮細胞ets1/E26 (E-twenty six 1 0.5mgets1/E26 (E-twenty six 1) Ets轉(zhuǎn)錄因子家族ets1抗原

CHEK1 Protein Human 重組人 CHK1 / CHEK1 蛋白 (GST 標簽)

FIGF重組大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 標簽) Protein

CTSE Protein Mouse 重組小鼠 Cathepsin E / CTSE 蛋白 (His 標簽)

IL12A & IL12B重組人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein

原代細胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細胞團或單個細胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細胞懸液細胞密度過大，再補加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。