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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無(wú)菌操作?：整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程需要在無(wú)菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實(shí)驗(yàn)研究使用! 不能用于臨床或動(dòng)物診斷！

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

兔小氣道平滑肌分離自小氣道組織；臨床上通常將內(nèi)徑小于2mm的小細(xì)支氣管稱為小氣道。小氣道具有氣流阻力小，但易阻塞的特點(diǎn)。在平靜吸氣時(shí)，空氣進(jìn)入狹窄的鼻咽部，產(chǎn)生渦流。由于小氣道已無(wú)軟骨支持，在脫離纖維鞘嵌入肺組織后，管腔通暢性不象軟骨性氣道，易于受胸腔的壓力變化的影響。小氣道上皮細(xì)胞形成連續(xù)呼吸道內(nèi)層，作為隔絕外界有害物質(zhì)的物理和功能屏障發(fā)揮著的作用。小氣道位于肺泡和氣管的交界處，這些細(xì)胞在功能上能夠調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)、產(chǎn)生化學(xué)因子進(jìn)行宿主防御、表達(dá)粘附分子，并可能通過(guò)HLA-DR表達(dá)呈遞抗原；它們還能產(chǎn)生液體有助于肺液的平衡。許多呼吸道疾病，如哮喘、支氣管炎、慢性阻塞性肺病和囊性纖維化，都涉及呼吸道表面上皮細(xì)胞的破壞；小氣道上皮細(xì)胞的培養(yǎng)可為防止呼吸道擴(kuò)增疾病和重塑提供新的治療選擇。小氣道平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見(jiàn)細(xì)胞貼壁伸展，細(xì)胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細(xì)胞匯合，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng)，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí)，常交織成網(wǎng)狀；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn)。小氣道的生理功能特點(diǎn)：①小氣道阻力?。虎跉饬魉俣嚷?；③可調(diào)節(jié)控制通氣與血流比例。小氣管平滑肌細(xì)胞主要功能：①保持氣道張力維持小氣道形態(tài)；②肺小氣道進(jìn)行氣體交換，病變可引起換氣功能障礙；③炎癥、痰液阻塞或當(dāng)氣道外壓大于氣道內(nèi)壓時(shí)容易造成小氣道閉合、萎陷。小氣管平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化：①支氣管炎；②肺氣腫；③慢性阻塞性肺疾病。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔小氣道平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的兔小氣道平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、EGF、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動(dòng)物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個(gè)細(xì)胞。

?細(xì)胞計(jì)數(shù)?：使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)器或其他方法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時(shí)進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

豚鼠單胺氧化酶(MAO)ELISA試劑盒 ，英文名： MAO ELISA Kit

Human poly ADP ribose polymerase (PARP) ELISA Kit 人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA試劑盒

RabbitcoagulationfactorⅡ,FⅡELISAKit 兔子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBeta-Nph(HumanBeta-naphthol)ELISAKit人β萘酚規(guī)格：48T/96T

細(xì)菌西蒙(SIMMON)檸檬酸瓊脂平板50個(gè)

rabbitImmunoglobulinE,IgEELISAKit兔子免疫球蛋白E(IgE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

人重組激活基因2elisa試劑盒   人重組激活基因2試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人重組激活基因2試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人重組激活基因2試劑盒、人重組激活基因2 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

人重組激活基因1elisa試劑盒   人重組激活基因1試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人重組激活基因1試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人重組激活基因1試劑盒、人重組激活基因1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

人重去甲上腺素elisa試劑盒   人重去甲上腺素試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人重去甲上腺素試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人重去甲上腺素試劑盒、人重去甲上腺素elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

人血管生長(zhǎng)因子elisa試劑盒   人血管生長(zhǎng)因子試劑盒   規(guī)格型號(hào)：96T/48T   人血管生長(zhǎng)因子試劑盒，規(guī)格型號(hào)：96T/48T，來(lái)源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人血管生長(zhǎng)因子試劑盒、人血管生長(zhǎng)因子elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個(gè)月。

大鼠TGFβ誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1(TIEG1)ELISA試劑盒 ，英文名： TIEG1 ELISA Kit

Human urinary bladder cancer aigen (UBC) ELISA Kit 人膀胱癌抗原(UBC)ELISA試劑盒

Chickenprolactin,PRLELISAKit 雞催乳素(PRL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforCCL1(HumanEotaxin1)ELISAKit人嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白規(guī)格：48T/96T

細(xì)菌5-羥色胺-N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶(SerotoninN-Acetylansferase)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

RatAngiotensinⅠConveingEnzyme,ACEⅠELISAKit大鼠血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

UNC5B重組大鼠 UNC5B / UNC5H2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1 0.5mgCX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1) CX3C趨化因子受體1抗原

TXNRD1重組人 TXNRD1 / TRXR1 蛋白 (aa 161-647, His 標(biāo)簽) Protein

IL37 Protein Human 重組人 IL37 / IL1F7 / IL-1H4 蛋白

CD7 Protein Mouse 重組小鼠 CD7 蛋白 (His 標(biāo)簽)

兔小氣道平滑肌細(xì)胞CX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1 0.5mgCX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1) CX3C趨化因子受體1抗原

IL37 Protein Human 重組人 IL37 / IL1F7 / IL-1H4 蛋白

UNC5B重組大鼠 UNC5B / UNC5H2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD7 Protein Mouse 重組小鼠 CD7 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TXNRD1重組人 TXNRD1 / TRXR1 蛋白 (aa 161-647, His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用