上海莼試生物技術(shù)有限公司
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上海市
更新時間:2024-10-04 12:53:07瀏覽次數(shù):54
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原代細胞VS細胞系:
用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說,從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞,絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān)),再加上取材,成本等因素,通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。
商品屬性:
組織來源 | 嗅球 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號 | CS-X3858 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞簡介:
兔嗅球分離自嗅球組織;嗅球是脊椎動物前腦結(jié)構(gòu)中參與嗅覺的部分,用于感知氣味。嗅球分為二個不同的結(jié)構(gòu):主嗅球及輔助嗅球。在大腦額葉來自許多嗅細胞的神經(jīng)纖維纏集在一起,形成線球狀的部分。在這里,纖維與多個次級神經(jīng)元——僧帽細胞的樹突相連接,進而由這里伸出神經(jīng)纖維形成嗅囊,終止于額葉下方。一般認為它在嗅味的辨別中具有重要的功能。對于大部份的脊椎動物而言,嗅球位在大腦的前面,不過人的嗅球位于大腦的內(nèi)部。嗅球由篩骨的篩板固定且保護嗅球,哺乳動物的篩板會分隔嗅球和嗅上皮,而嗅神經(jīng)會穿過篩板中的篩孔而連接到嗅球。嗅球分為二個不同的結(jié)構(gòu):主嗅球及輔助嗅球。
方法簡介:
實驗室分離的兔嗅球經(jīng)MAP-2免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔嗅球采用消化法結(jié)合神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基:含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2天半量換液1次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):神經(jīng)元細胞樣
傳代特性:不傳代,不增殖,存活1-2周
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細胞一般傳至10代左右,大部分細胞衰老死亡,但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去,存活的細胞一般能夠傳到40-50代,叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機",這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c,從而可能無限制地傳代下去,稱為細胞系。
也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系,因此,細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞,廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法,從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。
細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點,也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。
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IL12A重組食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ICAM-2/CD102(intercellular adhesion molecules-2 0.5mgICAM-2/CD102(intercellular adhesion molecules-2) 細胞間粘附分子-2抗原
CDK16重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標簽) Protein
IZUMO1 Protein Human 重組人 IZUMO1 蛋白 (His 標簽)
PLK1 Protein Mouse 重組小鼠 PLK1 / PLK-1 蛋白 (His 標簽)
兔嗅球細胞ICAM-2/CD102(intercellular adhesion molecules-2 0.5mgICAM-2/CD102(intercellular adhesion molecules-2) 細胞間粘附分子-2抗原
IZUMO1 Protein Human 重組人 IZUMO1 蛋白 (His 標簽)
IL12A重組食蟹猴 / 恒河猴 IL12A / NKSF1 蛋白 (Fc 標簽) Protein
PLK1 Protein Mouse 重組小鼠 PLK1 / PLK-1 蛋白 (His 標簽)
CDK16重組人 CDK16 / PCTAIRE1 / PCTK1 蛋白 (GST 標簽) Protein
原代細胞培養(yǎng)的具體步驟:
1、準備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3、處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500-1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7、計數(shù):用計數(shù)板計數(shù),如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說,pH要求在7.2-7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。
8、培養(yǎng):置于37℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時需要換新塞。