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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

兔椎間盤髓核分離椎間盤組織；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間，分為中央部的髓核，富于彈性的膠狀物質(zhì)；周圍部的纖維環(huán)，由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板，是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊，使纖維環(huán)成為堅實的組織，能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷。髓核，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性，為椎間盤結(jié)構(gòu)的一部分，位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì)。嬰幼兒時期的髓核含水量為80%-90%，即使到了老年，其含水量也在70%上下。髓核在出生時體積大而松散，位于椎間盤的中央，至成年時位置移至椎間盤的中后部；在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長，髓核中的蛋白多糖解聚增多，水分逐漸減少，膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。

方法簡介：

公司實驗室分離的兔椎間盤髓核經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的兔椎間盤髓核采用膠原酶-混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每3-4天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計數(shù)?：使用血細(xì)胞計數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠神經(jīng)生長因子(NGF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human leptin receptor (LR/Ob-R) ELISA Kit 人苗條素受體(LR/Ob-R)ELISA試劑盒

HumanHighdensitylipoprotein,HDLELISAKit 人高密度脂蛋白(HDL)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

GoatacetoneELISA試劑盒山羊同檢測(acetone)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

真菌/酵母過氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量檢測試劑盒20次

MouseCollageypeⅣ,ColⅣELISAKit小鼠Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠前心肽(Pro-ANP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠N端前腦素(-proBNP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠抗復(fù)合物(TAT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠Rho鳥苷酸交換因子7(Arhgef7/Pak3bp/Pixb)ELISA試劑盒 ，英文名： Arhgef7/Pak3bp/Pixb ELISA Kit

Mouse toxic shock syndrome toxin 1 iegrated (TSST-1) ELISA Kit 小鼠毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠組織因子(mouse TF) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforIFN-Beta/IFNBELISAKit大鼠β干擾素規(guī)格：48T/96T

通用型禽腦脊髓炎(AvianEncephalomyelitis;AE)試劑盒20次

ELISAKitVB12大鼠B12規(guī)格：48T/96T

MAP2K1重組小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 蛋白 Protein

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)重組蛋白 Recombinant Alanine Aminotransferase (ALT)

EGFL6重組人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

COL2A1 Protein Human 重組人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 標(biāo)簽)

IL20RA Protein Canine 重組狗 IL20RA / IL-20RA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

兔椎間盤髓核細(xì)胞谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)重組蛋白 Recombinant Alanine Aminotransferase (ALT)

COL2A1 Protein Human 重組人 COL2A1 蛋白 (aa 1242-1487, His 標(biāo)簽)

MAP2K1重組小鼠 MEK1 / MAP2K1 / MKK1 蛋白 Protein

IL20RA Protein Canine 重組狗 IL20RA / IL-20RA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

EGFL6重組人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用