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原代細胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應保持在7.2~7.4之間，以維持細胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進行，以促進細胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細胞簡介：

小鼠顳下頜關節(jié)軟骨分離自顳下頜關節(jié)軟骨組織，顳下頜關節(jié)又稱顳頜關節(jié)"或下頜關節(jié)"。由下頜頭與顳骨下頜窩和關節(jié)結節(jié)組成，左右合成一聯(lián)合關節(jié)，主理張口閉口和咀嚼運動。關節(jié)囊松弛，側(cè)方為內(nèi)、外側(cè)韌帶所加強。囊內(nèi)的關節(jié)盤呈卵圓形，由纖維軟骨組成，區(qū)分為前、中、后三部分。上面呈鞍狀，前凹后凸，與關節(jié)結節(jié)和下頜窩的凸凹輪廓相對應；下面凹正對下頜頭，周緣與關節(jié)囊相接，前緣與穿過關節(jié)囊的翼外肌腱相連。關節(jié)盤將關節(jié)腔分成上、下兩半。關節(jié)外更有蝶下頜韌帶(蝶棘至下頜小舌)和莖突下頜韌帶(莖突至下頜角)予以加固。關節(jié)軟骨屬于透明軟骨，表面光滑、呈淡藍色、有光澤，它是由一種特殊的叫做致密結締組織的膠原纖維構成的基本框架，這種框架呈半環(huán)形，類似拱形球門，其底端緊緊附著在下面的骨質(zhì)上，上端朝向關節(jié)面，這種結構使關節(jié)軟骨緊緊與骨結合起來而不會掉下來，同時當受到壓力時候，還可以有少許的變形，起到緩沖壓力的作用。在這些纖維之間，散在分布著軟骨細胞，軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成，這些軟骨細胞維持關節(jié)軟骨的正常代謝。關節(jié)軟骨沒有神經(jīng)支配，也沒有血管，其營養(yǎng)成分必須從關節(jié)液中取得，而其代謝廢物也必須排至關節(jié)液中，關節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關節(jié)運動，使關節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行，所以關節(jié)運動對于維持關節(jié)軟骨的正常結構起重要的作用。關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的關節(jié)軟骨細胞位于關節(jié)軟骨組織的表層，單個分布、體積較小、呈橢圓形，長軸與關節(jié)軟骨表面平行，越向深層的關節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形，細胞核圓形或卵圓形、染色淺，細胞質(zhì)弱嗜堿性，常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關節(jié)軟骨陷窩內(nèi)，這些關節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成，稱為同源細胞群。電鏡下，關節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶，細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體。在組織切片中，關節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形，在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的關節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

方法簡介：

實驗室分離的小鼠顳下頜關節(jié)軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的小鼠顳下頜關節(jié)軟骨采用膠原酶聯(lián)合消化制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每3-4天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態(tài)：梭形、多角形

傳代特性：可傳2-3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細胞。

?細胞計數(shù)?：使用血細胞計數(shù)器或其他方法對細胞進行計數(shù)，確保細胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當細胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng)，以維持細胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠雌二醇受體(ER)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat Glucose depende insulinoopic polypeptide (GIP) ELISA Kit 大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISA試劑盒

HumanangiostatinELISAKit 人血管抑素/血管穩(wěn)定蛋白(angiostatin)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanBeta-HydroxybyricAcid,β-OHBELISA試劑盒人β(β-OHB)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

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Humansystemiclupuserythematosus,SLEELISAKit人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ElisaKit   ELISA.   96T/48T

中文名稱   方法   規(guī)格

豚鼠白介素12(IL-12/P70)ELISAKIT   ELISA.   96T/48T

大鼠成纖維細胞生長因子13(FGF-13)ELISA試劑盒 ，英文名： FGF-13 ELISA Kit

Mouse CXC chemokine ligand 16 (CXCL16) ELISA Kit 小鼠CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠補體C5a(mouse C5a) 48T/96 進口分裝

CLIAKitforLepIgG(RabbitLeptospiraIgG)ELISAKit兔鉤端螺旋體IgG規(guī)格：48T/96

通用型HSV1(HERPESSIMPLX1)病毒定量PCR擴增檢測試劑盒20次

ELISAKitTNF-α猴腫瘤壞死因子α規(guī)格：48T/96

REN重組人 Renin 蛋白 (His 標簽) Protein

細胞間粘附分子2(ICAM2)重組蛋白 Recombinant Intercellular Adhesion Molecule 2 (ICAM2)

CSF1重組人 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標簽) Protein

FOLR2 Protein Human 重組人 FOLR2 / FBP 蛋白 (His 標簽)

HA Protein H7N7 重組甲型流感 H7N7 (A/Nlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)

小鼠顳下頜關節(jié)軟骨細胞細胞間粘附分子2(ICAM2)重組蛋白 Recombinant Intercellular Adhesion Molecule 2 (ICAM2)

FOLR2 Protein Human 重組人 FOLR2 / FBP 蛋白 (His 標簽)

REN重組人 Renin 蛋白 (His 標簽) Protein

HA Protein H7N7 重組甲型流感 H7N7 (A/Nlands/219/03) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽)

CSF1重組人 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 標簽) Protein

原代細胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用