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上海研伴實(shí)業(yè)有限公司
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廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
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更新時(shí)間：2017-12-01 14:16:21瀏覽次數(shù)：422次
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登革熱試劑盒廠家提供詳細(xì)的實(shí)驗(yàn)步驟,試劑準(zhǔn)備的信息。
登革熱試劑盒是由一種酶聯(lián)擴(kuò)大的兩步法免疫檢測(cè)系統(tǒng)。在此實(shí)驗(yàn)中，將登革熱陰性質(zhì)控、陽(yáng)性質(zhì)控和未知濃度的血清樣品用樣品稀釋液稀釋，然后加入到包被 了抗人IgM抗體的微孔中溫育，之后分別加入登革熱源性重組抗原DENVRA和正常細(xì)胞抗原（NCA）進(jìn)行溫育。溫育并洗板后，用HRP標(biāo)記的DEN特異 性抗體處理。第二次溫育并洗板后，加入TMB底物液進(jìn)行溫育。之后再加入酸性終止液，450nm處測(cè)OD值可確定底物反應(yīng)的程度。當(dāng)高于一定數(shù)值時(shí)（臨界 值），樣品的吸光度值可確定樣品中是否存在登革熱抗體。
登革熱試劑盒樣品的采集與準(zhǔn)備：
1）此實(shí)驗(yàn)必須用血清來(lái)做。全血和血漿樣本不能直接檢測(cè)。
2）不要將不同批次的試劑混亂
3）不要加熱熱滅活的試驗(yàn)血清
4）實(shí)驗(yàn)前將所有試劑平衡至室溫，溫度的改變會(huì)對(duì)試驗(yàn)有影響
5）避免反復(fù)凍融樣品血清
6）直接用干凈的槍頭從試劑瓶中移去試劑，不能轉(zhuǎn)移，避免污染
7）不用的板條應(yīng)立即放回至密封袋中保存
8）不要使用任何過(guò)期的試劑
9）避免試劑暴露受熱或陽(yáng)光直射
10）有些試劑可能會(huì)產(chǎn)生沉淀，使用前一定要混勻
11）洗滌過(guò)程不完整會(huì)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響
12）為了減少由于孵育時(shí)間的差異而引起的漂移，建議底物液和終止液加入的時(shí)間和速度要*
13）避免試劑中有微生物污染，尤其是酶聯(lián)物
14）每一次吸取試劑，標(biāo)準(zhǔn)品，質(zhì)控品時(shí)都應(yīng)用干凈的槍頭
實(shí)驗(yàn)步驟：
將所有的試劑成分和樣品都平衡至室溫。實(shí)驗(yàn)前反復(fù)倒置以混合試劑和樣品。
試劑準(zhǔn)備：
1）1X洗滌液的配制：用生物學(xué)或高純度水將10倍濃縮型的洗滌液稀釋成1X的洗滌液。為了制備即用型的洗滌緩沖 液，我們可以將120ml 10倍濃縮的洗滌液加入到1080ml蒸餾水或去離子水中，沖洗掉所有晶體，旋渦混合溶液以至所有晶體都溶解掉。制備好的洗滌液可在室溫下穩(wěn)定儲(chǔ)存6個(gè)月。使用前請(qǐng)檢查洗滌液是否被污染。
2）包被板的準(zhǔn)備：將實(shí)驗(yàn)所需數(shù)目的板條置于板架上。將剩余的板條立即裝入包裝袋中，并儲(chǔ)存于2-8℃的環(huán)境下，有效期內(nèi)穩(wěn)定。
用于定性檢測(cè)血清中登革病毒（血清型1、2、3及4型）的IgG抗體，用于臨床實(shí)驗(yàn)室對(duì)具有持續(xù)發(fā)燒的登革感染癥狀或接觸史的患者的輔助性診斷。
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