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原代細(xì)胞培養(yǎng)條件：

?溫度?：通常在37℃下進(jìn)行，以模擬體內(nèi)溫度。

?pH值?：培養(yǎng)液的pH值應(yīng)保持在7.2~7.4之間，以維持細(xì)胞的正常生理狀態(tài)。

?氣體環(huán)境?：在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進(jìn)行，以促進(jìn)細(xì)胞生長。

?培養(yǎng)基?：使用含有適當(dāng)營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基，如Eagle's MEM、DMEM等。

?無菌操作?：整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進(jìn)行，以防止污染。

本產(chǎn)品僅供科學(xué)實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷！

細(xì)胞簡介：

小鼠瘢痕疙瘩成纖維分離自皮膚瘢痕疙瘩組織；瘢痕疙瘩，俗稱疤痕疙瘩，是皮膚傷口愈合或不明原因所致皮膚損傷愈合后所形成的過度生長的異常瘢痕組織，目前學(xué)術(shù)界認(rèn)為各種原因?qū)е碌鸟：廴缇哂幸韵绿攸c，可診斷為瘢痕疙瘩：①病變超過原始皮膚損傷范圍；②呈持續(xù)性生長；③高起皮膚表面、質(zhì)硬韌、顏色發(fā)紅的結(jié)節(jié)狀、條索狀或片狀腫塊。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞同正常皮膚成纖維細(xì)胞在形態(tài)上沒有表現(xiàn)出明顯的差異。瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞生長同正常皮膚成纖維細(xì)胞的生長沒有明顯的差別。癜痕成纖維細(xì)胞對血清的依賴性低于正常皮膚成纖維細(xì)胞。

方法簡介：

實驗室分離的小鼠瘢痕疙瘩成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

實驗室分離的小鼠瘢痕疙瘩成纖維采用先消化、后-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下：

?組織處理?：將動物組織從機(jī)體中取出，剪碎后用等消化酶處理，使其分散成單個細(xì)胞。

?細(xì)胞計數(shù)?：使用血細(xì)胞計數(shù)器或其他方法對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)，確保細(xì)胞密度適中。

?接種培養(yǎng)?：將細(xì)胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中，加入適量的培養(yǎng)基，置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

?換液和傳代?：定期更換培養(yǎng)液，當(dāng)細(xì)胞達(dá)到一定密度時進(jìn)行傳代培養(yǎng)，以維持細(xì)胞的生長狀態(tài)。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1Ra)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human sialic acid (SA) ELISA Kit 人唾液酸(SA)ELISA試劑盒

HumaniactParathormone,i-PTHELISAKit 人全段甲狀旁腺素(i-PTH)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancardiacankyriepeatdomain1,ANKRD1ELISA試劑盒人心肌錨蛋白重復(fù)域1(ANKRD1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組腺病毒載體轉(zhuǎn)染試劑盒10次

HumanSolubleClusterofdiffereiation38,sCD38ELISAKit人可溶性CD38(sCD38)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

兔子膠原酶II(CollagenaseII)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子膠原酶I(CollagenaseI)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子堿性成纖維細(xì)胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子甲狀腺素(T4)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

大鼠胰島素樣生長因子1(IGF1)ELISA試劑盒 ，英文名： IGF1 ELISA Kit

Mouse brain derived neuroophic factor (BDNF) ELISA Kit 小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)ELISA試劑盒

Mouseierleukin8,IL-8ELISAKit 小鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanCoisolELISAKit人唾液規(guī)格：48T/96T

細(xì)胞BLK激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

ELISAKitBMPR-1A大鼠骨成型蛋白受體1A規(guī)格：48T/96T

SELP重組食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IDE 胰島素降解酶(抗原 0.5mgIDE 胰島素降解酶(抗原)

BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

GIF Protein Human 重組人 Gastric intrinsic factor / GIF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

KLRB1F Protein Mouse 重組小鼠 KLRB1F / NKR-P1F 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

小鼠瘢痕疙瘩成纖維細(xì)胞IDE 胰島素降解酶(抗原 0.5mgIDE 胰島素降解酶(抗原)

GIF Protein Human 重組人 Gastric intrinsic factor / GIF 蛋白 (His 標(biāo)簽)

SELP重組食蟹猴 / 恒河猴 SELP / selectin P / P-selectin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

KLRB1F Protein Mouse 重組小鼠 KLRB1F / NKR-P1F 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

BTK重組人 Bruton Tyrosine Kinase / BTK Kinase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞的4種培養(yǎng)方法：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用