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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

?小鼠真皮毛乳頭細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

小鼠真皮毛乳頭分離自皮膚毛囊組織；毛囊是表皮細(xì)胞連續(xù)形成的袋樣上皮。其基底是真皮凹進(jìn)的真皮毛乳頭，中心是一根毛發(fā)，立毛肌的一側(cè)斜附在毛囊壁上，附著點(diǎn)的上方為皮脂腺通入毛囊的短頸，毛囊在皮膚表面的開口是毛囊孔。毛囊位于真皮和皮下組織中，毛囊向下伸入真皮約有一厘米深度，它是由包繞毛發(fā)與表皮相連的上皮鞘，以及皮脂腺和立毛肌所組成的一個結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜的器官附件組織。毛囊實(shí)際上是由結(jié)締組織和上皮兩部分所組成，除了具有結(jié)締組織和血管的真皮乳頭（毛乳頭）外，毛囊其余部分都是由表皮細(xì)胞分化而來。真皮毛乳頭細(xì)胞位于毛囊基底部，是一類成纖維細(xì)胞。在毛囊發(fā)育早期，真皮細(xì)胞向單層上皮細(xì)胞發(fā)出真皮信號，刺激上皮局部形成毛基板。隨后毛基板細(xì)胞向下方的真皮發(fā)出表皮信號，誘導(dǎo)其形成有成纖維細(xì)胞組成的凝集細(xì)胞團(tuán)。在此過程中，毛母質(zhì)細(xì)胞逐漸包裹凝集細(xì)胞團(tuán)，形成成熟的真皮毛乳頭細(xì)胞。作為毛囊中的重要細(xì)胞群，真皮毛乳頭細(xì)胞的分子機(jī)制和臨床應(yīng)用正在被逐漸認(rèn)識和解析。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠真皮毛乳頭經(jīng)層粘連蛋白免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠真皮毛乳頭采用膠原酶-混合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次；

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機(jī)"，這時有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human epithelial neuophil activating peptide 78 (ENA-78/CXCL5) ELISA Kit 人上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒

HumanleukocyteaigenA,HLA-AELISAKit 人類白細(xì)胞抗原A(HLA-A)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-hepatitisAvirusIgGaibody,ai-HAVELISA試劑盒人抗甲型肝炎病毒IgG抗體(ai-HAV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物0酸葡萄糖變位酶(phosphoglucomase;PGM)活性光譜法定量檢測試劑盒20次

Humanvimein,VIMELISAKit人波形蛋白(VIM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠表皮生長因子(mouse EGF)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠表皮生長因子受體(mouse EGF R)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠內(nèi)皮素-1(mouse Endothelin-1)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

小鼠噬酸性粒細(xì)胞趨化因子(mouse Eotaxin)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進(jìn)口分裝

大鼠白介素28A(IL-28A)ELISA試劑盒 ，英文名： IL-28A ELISA Kit

Mouse ierleukin 9 (IL-9) ELISA Kit 小鼠白介素9(IL-9)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠IgA(mouse IgA) 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforILK-1(Humaniegrin-linkedkinase1)ELISAKit人整合素連接激酶1規(guī)格：48T/96T

通用型胱(cystine)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次

ELISAKitOSM大鼠抑瘤素M規(guī)格：48T/96T

EPCAM重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta 0.5mgIL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β(白細(xì)胞介素-1β)(多肽抗原)

CSNK1A1重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

EPHA3 Protein Human 重組人 EphA3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD84 Protein Mouse 重組小鼠 CD84 蛋白 (His 標(biāo)簽)

小鼠真皮毛乳頭細(xì)胞IL-1 Beta(Interleukin-1 Beta 0.5mgIL-1 Beta(Interleukin-1 Beta) 白介素1β(白細(xì)胞介素-1β)(多肽抗原)

EPHA3 Protein Human 重組人 EphA3 蛋白 (His 標(biāo)簽)

EPCAM重組食蟹猴 / 恒河猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD84 Protein Mouse 重組小鼠 CD84 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CSNK1A1重組人 CSNK1A1 / CKI-alpha / CK1 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計(jì)數(shù)：用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。