南京億迅生物科技有限公司
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參考價(jià) | ¥ 450 |
訂貨量 | 1 |
- 型號(hào)
- 品牌
- 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
- 所在地 南京市
更新時(shí)間:2019-06-11 21:45:29瀏覽次數(shù):356
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產(chǎn)品名稱: 酸性磷酸酶染色液(*法)
規(guī)格:2X50ml
用途:酸性磷酸酶染色
注意事項(xiàng):主要由孵育液、硫化液、陰性對(duì)照等組成。染色后酶活性部位呈棕黑色硫化鉛沉淀。
儲(chǔ)存條件:4℃,避光,6個(gè)月
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為蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能研究, 需將蛋白質(zhì)分離、 純化, 從而提高其比活。 分離蛋白質(zhì)一般
用等電點(diǎn)沉淀、 鹽析和有機(jī)溶劑分級(jí)分離。 而純化則常用層析法、 分子篩和離子交換法。 可
能的話, 用親和層析。 后提純用電泳及等電點(diǎn)聚焦技術(shù)。
分離、 純化方法基于:
1. 根據(jù)分子大小
(1) 透析和超過(guò)濾 利用蛋白質(zhì)分子不能透過(guò)半透膜, 使蛋白質(zhì)和其他小分子物質(zhì)分開(kāi),
叫透析。 利用壓力或離心力, 強(qiáng)使水和其他小分子溶質(zhì)通過(guò)半透膜, 叫超過(guò)濾。
(2) 密度梯度離心 如果蛋白質(zhì)顆粒在具有密度梯度的介質(zhì)(常用蔗糖梯度) 中離心時(shí),
質(zhì)量和密度大的顆粒比質(zhì)量和密度小的顆粒沉降快并且每種蛋白質(zhì)顆粒沉降到與自身密度
相等的介質(zhì)梯度時(shí), 即停止不前, 后在各種離心管中被分離成各自獨(dú)立的區(qū)帶, 分部分收
集。
(3) 分子篩層析 也叫凝膠過(guò)濾。 它是根據(jù)分子大小分離蛋白質(zhì)混合物的有效的方法
之一。當(dāng)不同分子大小的蛋白質(zhì)混合液通過(guò)裝填有高度水化的惰性多聚體(常用葡聚糖凝膠)
和瓊脂糖凝膠的層析柱時(shí), 比凝膠“網(wǎng)眼” 大的蛋白質(zhì)分子不能進(jìn)入“網(wǎng)眼” 而被排阻在凝
膠顆粒之外, 后隨洗脫劑流出。 比“網(wǎng)眼” 小的分子則進(jìn)入凝膠顆粒的內(nèi)部。
2. 利用溶解度差別
(1) 等電點(diǎn)沉淀和 pH 控制 當(dāng)?shù)鞍踪|(zhì)混合物的 pH 被調(diào)到其中一種成分的等電點(diǎn) pH 時(shí),
則該蛋白質(zhì)大部或全部將沉淀下來(lái), 那些等電點(diǎn)高于或低于該 pH 的蛋白質(zhì)仍留在溶液中。
這樣沉淀出來(lái)的等電蛋白保持著天然構(gòu)象, 能再溶解。
(2) 鹽析 它是蛋白質(zhì)制劑的分離和純化過(guò)程中常用的方法之一。 常用高濃度中性鹽,
如(NH 4 ) 2 SO 4 , HgCl 2 等, 它們影響蛋白質(zhì)溶解度的能力是它們離子強(qiáng)度的函數(shù)。 鹽析法能
保持蛋白質(zhì)的天然構(gòu)象, 能再溶解。
(3) 有機(jī)溶劑分級(jí)分離 乙醇、 丙垌等有機(jī)溶劑能加強(qiáng)同一或相鄰蛋白質(zhì)分子中相反電
荷之間的吸引力, 使蛋白質(zhì)分子趨于凝集、 沉淀。 操作須在低溫下進(jìn)行。
酸性磷酸酶染色液(*法)
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