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南京億迅生物科技有限公司
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| 參考價 | ￥ 735 | ￥ 550 |
| 訂貨量 | 1件 | 5件 |
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- 所在地 南京市
更新時間：2019-11-07 14:57:25瀏覽次數(shù)：487
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堿性蛋白酶檢測試劑盒
測定原理：
在堿性條件下，AKP水解酪蛋白生成酪氨酸；在堿性條件下，酪氨酸還原磷鉬酸生成鎢藍；鎢藍在680nm有特征吸收峰，測定680nm吸光度增加速率，來計算AKP活性。
自備儀器和用品：
可見分光光度計/、微量玻璃比色皿/96孔板、水浴鍋、磁力攪拌器、可調式移液槍、0.5 mL EP管和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加5mL蒸餾水溶解。
試劑三：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加入5mL試劑一，沸水浴中磁力攪拌溶解。
試劑四：粉劑×1瓶， 4℃保存。臨用前加20mL蒸餾水溶解。
試劑五：液體×1瓶，4℃保存。
標準品：液體×1支，0.25μmol/mL標準酪氨酸溶液，4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
稱取約0.1g組織，加入1mL試劑一，冰上充分研磨，10000rpm 4℃離心10min，取上清液，即粗酶液。
測定：
1.分光光度計預熱30min以上，調節(jié)波長到680 nm，蒸餾水調零。
2.試劑二、試劑三和試劑四置于40℃水浴保溫30min以上。
3. 空白管：取0.5 mL EP管，加入20 μL粗酶液，40 μL試劑二，混勻后置于40℃水浴保溫10min；加入40μL試劑三，混勻后10000rpm 4℃離心10min；取40μL上清液，加入新的EP管，再加入200μL試劑四，40μL試劑五，混勻后置于40℃水浴保溫20min，吸取200μL于680nm測定光吸收，記為A空白管。
4. 測定管：取0.5 mL EP管，加入20μL粗酶液，40μL試劑三，混勻后置于40℃水浴保溫10min；加入40μL試劑二，混勻后10000rpm 4℃離心10min；取40μL上清液，加入新的EP管，再加入200μL試劑四，40μL試劑五，混勻后置于40℃水浴保溫20min，吸取200μL于680nm測定光吸收，記為A測定管。（注意與空白管不同，先加試劑三，后加試劑二）
5. 標準管：取0.5 mL EP管，加入40μL標準品，200μL試劑四，40μL試劑五，混勻后置于40℃水浴保溫20min，吸取200μL于680nm測定光吸收，記為A標準管。
堿性蛋白酶檢測試劑盒
