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1×106 1500元 15瓶可售
更新時(shí)間:2024-05-30 11:53:34瀏覽次數(shù):62次
聯(lián)系我時(shí),請告知來自 環(huán)保在線貨號(hào) | XG-X3311 | 生長特性 | 貼壁生長 |
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細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
運(yùn)輸和保存:
干冰運(yùn)輸及復(fù)蘇好存活細(xì)胞
(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。
(2)T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
商品信息:
名稱產(chǎn)品 | HCC1937人乳腺癌細(xì)胞 | 產(chǎn)品別稱 | HCC-1937 |
種屬 | 人 | 生長特性 | 貼壁細(xì)胞 |
換液頻率 | 2-3次/周 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
貨號(hào) | XG-X3311 | 組織來源 | 乳房;原發(fā)性導(dǎo)管癌;3級(jí),ⅡB期 |
凍存液:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度:液氮
培養(yǎng)條件
氣相:空氣,95%;CO2,5%
溫度:37℃
推薦傳代比例 1:2-1:4
背景描述 HCC1937細(xì)胞1995年10月13日最初來源于原發(fā)性導(dǎo)管癌,用了11.5個(gè)月建株。腫瘤分類為TNMⅡB期,3級(jí)。BRCA1分析表明,HCC1937細(xì)胞是BRCA 15382C突變純合的,而來源于同一病人的類淋巴母細(xì)胞細(xì)胞株在這個(gè)突變位點(diǎn)上是雜合的。另兩個(gè)家庭成員也有這個(gè)突變;一個(gè)同卵雙生姐妹也患有乳腺癌。HCC1937細(xì)胞有一個(gè)后天的Tp53突變,而其野生型等位基因丟失;一個(gè)PTEN基因的后天的純合缺失,以及多個(gè)與乳腺癌發(fā)病機(jī)理相關(guān)的位點(diǎn)上發(fā)生的雜合突變。HCC1937細(xì)胞Her2-neu和p53表達(dá)都呈陰性。HCC1937細(xì)胞的上皮細(xì)胞特異性標(biāo)志上皮細(xì)胞糖蛋2(EGP2)和細(xì)胞角蛋白19都呈陽性;雌激su受體(ER)和孕酮(PR)表達(dá)陰性。
年齡(性別) 女;23歲
組織來源 乳房;原發(fā)性導(dǎo)管癌;3級(jí),ⅡB期
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 乳腺癌細(xì)胞
生物安全等級(jí) 1
倍增時(shí)間 ~50-60 hours
受體表達(dá)情況 estrogen receptor, negative;progesterone receptor, negative
基因表達(dá)情況 Epithelial glycoprotein 2 (EGP2); cytokeratin 19
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; CRL-2336 DSMZ; ACC-513
細(xì)胞接收后的處理:
1)收到細(xì)胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2)請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài),同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)。
3)貼壁細(xì)胞:細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL,放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上,可以對(duì)細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中,若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
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細(xì)胞處理:
1) 凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,培養(yǎng)基重懸細(xì)胞。然后將細(xì)胞懸液加入含6-8ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況和細(xì)胞密度。
2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
2. 加入0.25%(w / v)-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。
3. 輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。
3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
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