傅經(jīng)理
movat五色染色
一、實驗步驟
1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來水洗。
2、阿利新藍染色:切片入阿利新藍染液中染色15min,自來水洗2min;
3、堿性乙醇分化:切片入熱的堿性乙醇(60℃預(yù)熱30min)中分化約3-5s,至無多余染液流 下,自來水洗;
3、 Weigert蘇木精染色:將蘇木精溶液:氯化鐵溶液:碘溶液=3:2:1混勻成染色液,切片入該染液避光染色30min,分化液分化,流水沖洗5min;
5、番紅O-酸性品紅染色:將番紅O:酸性品紅=4:1混合,切片入該染液3-5min,自來水稍洗;
6、磷鉬酸染色:切片入磷鉬酸1-2min;
7、冰醋酸染色:切片不水洗,直接入冰醋酸2-5min,自來水稍洗;
8、天狼猩紅染色:切片入天狼猩紅染液2min,2-3缸無水乙醇快速脫水;
9、透明封片:切片入二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,中性樹膠封片。
10、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。
二、結(jié)果判讀:
蛋白聚糖呈藍綠色,彈力纖維和細胞核呈黑色,膠原纖維呈紅色,肌纖維呈黃色,泡沫細胞呈紫色。
三、注意事項:
1、堿性乙醇分化時在顯微鏡下控制,至陽性明顯,無多余染液流下。
2、天狼猩紅染色時,需要嚴格控制時間,避免染色時間太長致使黑色的彈力纖維褪色。
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