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鈣黃綠素, AM CAS 148504-34-1

參  考  價(jià)面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號22003

品       牌AAT Bioquest

廠商性質(zhì)代理商

所  在  地西安市

更新時(shí)間:2024-01-31 11:50:07瀏覽次數(shù):145次

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Ex?(nm) 501 Em?(nm) 521
分子量 994.86 溶劑 DMSO
儲存條件 在零下15度以下保存,?避免光照
鈣黃綠素, AM CAS 148504-34-1是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的用于細(xì)胞活力測定的試劑

鈣黃綠素, AM CAS 148504-34-1是美國AAT Bioquest生產(chǎn)的用于細(xì)胞活力測定的試劑,Calcein AM是一種疏水性化合物,很容易滲透完整的活細(xì)胞。 它廣泛用于細(xì)胞活力測定。 通過細(xì)胞內(nèi)酯酶水解非熒光鈣黃綠素AM產(chǎn)生強(qiáng)熒光的親水鈣黃綠素,其在細(xì)胞質(zhì)中良好保留。 酯酶活性與小瓶細(xì)胞的數(shù)量成比例,因此與由鈣黃綠素AM的酯酶催化水解產(chǎn)生的鈣黃綠素的熒光強(qiáng)度直接相關(guān)。 Calcein AM是用于標(biāo)記和監(jiān)測活細(xì)胞細(xì)胞功能的的熒光探針之一。 然而,Calcein AM的單色使得在多色應(yīng)用中不可能使用這種有價(jià)值的試劑。 例如,由于Calcein AM具有與GFP相同的顏色,因此不可能將Calcein AM與GFP轉(zhuǎn)染的細(xì)胞組合使用。百螢生物是AAT Bioquest 的中國代理商,為您提供的鈣黃綠素, AM CAS 148504-34-1

實(shí)驗(yàn)方案

使用細(xì)胞活力指標(biāo)AM酯類

       AM酯是非極性酯,其易于穿過活細(xì)胞膜,并且通過活細(xì)胞內(nèi)的細(xì)胞酯酶快速水解。 AM酯廣泛用于非侵入性地將各種極性熒光探針加載到活細(xì)胞中。 但是,使用AM酯時(shí)必須小心,因?yàn)樗鼈円子谒?,特別是在溶液中。 它們應(yīng)在使用前重新配制成高質(zhì)量的無水二甲基亞砜(DMSO)。DMSO儲備溶液可以在20℃下干燥儲存并避光。 在這些條件下,AM酯應(yīng)穩(wěn)定數(shù)月。

       以下是我們推薦的將AM酯加載到活細(xì)胞中的方案。 該說明書僅提供指南,實(shí)際應(yīng)根據(jù)您的具體需求進(jìn)行修改。

a)在高質(zhì)量無水DMSO中制備2至5mM AM酯的儲備溶液。非離子洗滌劑Pluronic®F-127有時(shí)用于增加AM酯的水溶性。

注意:在稀釋到上樣緩沖液中之前,可將等體積的20%Pluronic®F-127溶液添加到細(xì)胞活力指示劑的DMSO儲備溶液中。終的Pluronic®F-127濃度約為0.02%。

注意:不建議在Pluronic®F-127存在下長期儲存AM酯。

b)在實(shí)驗(yàn)當(dāng)天,要么將細(xì)胞活力的固體指示劑溶解在DMSO中,要么將等分的指示劑儲備溶液解凍至室溫。在您選擇的緩沖液(如Hanks和Hepes緩沖液)中制備1至10μM的工作溶液。對于大多數(shù)細(xì)胞系,建議終濃度范圍為4至5μM的細(xì)胞活力指標(biāo)。細(xì)胞加載所需指標(biāo)的確切濃度必須根據(jù)經(jīng)驗(yàn)確定。

c)如果您的細(xì)胞含有有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白,可以在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入丙H舒(1-2.5 mM)或磺吡酮(0.1-0.25 mM),以減少脫酯化指標(biāo)的泄漏。在室溫或37℃下將細(xì)胞與AM酯孵育20分鐘至1小時(shí)。

d)在不含細(xì)胞活力指示劑的緩沖液(含有陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抑制劑,如果適用)中洗滌細(xì)胞以除去過量的探針。

注意:通過流式細(xì)胞術(shù)立即分析細(xì)胞樣品,以確定在零時(shí)間沒有洗滌的每個(gè)細(xì)胞的平均熒光。

e)在所需的Ex / Em波長下進(jìn)行實(shí)驗(yàn) 。



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