吲朵菁綠ICG-Osu是一種用于醫(yī)學(xué)診斷的花青染料。它用于確定心輸出量，肝功能和肝血流量，以及用于眼科血管造影。它具有接近800nm的峰值光譜吸收。這些紅外線能穿透視網(wǎng)膜層，使ICG血管造影成像比熒光血管造影更深的循環(huán)模式。ICG的半衰期為150至180秒，僅通過肝臟從膽汁液中排出。最近的一項(xiàng)研究表明ICG在注射后20分鐘內(nèi)靶向動脈粥樣硬化，并提供足夠的信號增強(qiáng)，用于動脈粥樣硬化兔子體內(nèi)的脂質(zhì)，發(fā)炎，冠狀動脈大小的斑塊的檢測。離體熒光反射成像顯示，與注射生理鹽水的動脈粥樣硬化兔相比，注射ICG的動脈粥樣硬化兔的斑塊靶 - 背景比高。氨基反應(yīng)性ICG衍生物用于與抗體和其他生物分子制備ICG生物綴合物。所有ICG染料都需要溶解在DMSO中。百螢生物為您提供優(yōu)質(zhì)的吲朵菁綠ICG-Osu。

將無水DMSO加入到ICG染料小瓶中以制備10-20mM儲備溶液。 通過移液或渦旋混合均勻。

注意：在開始綴合之前準(zhǔn)備染料儲備溶液（溶液B），現(xiàn)配現(xiàn)用，保持溶液新鮮。 染料儲備溶液的長期儲存可降低染料活性。 溶液B可以在不受光照和潮濕的情況下儲存在冰箱中兩周。 避免凍融循環(huán)。

3.確定染料/蛋白質(zhì)比例（可選）：

注意：每種蛋白質(zhì)都需要不同的染料/蛋白質(zhì)比例，這也取決于染料的性質(zhì)。蛋白質(zhì)的過度標(biāo)記可能對其結(jié)合親和力產(chǎn)生不利影響，而低染料/蛋白質(zhì)比率的蛋白質(zhì)綴合物會降低靈敏度。我們建議您通過使用連續(xù)不同量的標(biāo)記染料溶液重復(fù)步驟4和5來實(shí)驗(yàn)確定染料/蛋白質(zhì)比率。通常，對于大多數(shù)染料 - 蛋白質(zhì)綴合物，推薦使用4-6種染料/蛋白質(zhì)。

3.1使用10：1摩爾比的溶液B（染料）/溶液A（蛋白質(zhì)）作為起點(diǎn)：將5μl染料儲備溶液（溶液B，假設(shè)染料儲備溶液為10 mM）加入到樣品瓶中，蛋白質(zhì)溶液（95μl溶液A）。假設(shè)蛋白質(zhì)濃度為10mg / mL并且蛋白質(zhì)的分子量為~200KD，蛋白質(zhì)的濃度為~0.05mM。

注意：蛋白質(zhì)溶液中DMSO的濃度應(yīng)<10％。

3.2運(yùn)行結(jié)合反應(yīng)（見下面的步驟4）。

3.3重復(fù)＃3.2，溶液B /溶液A的摩爾比為5：1;分別為15：1和20：1。

3.4使用預(yù)制的旋轉(zhuǎn)柱純化所需的綴合物。

3.5計(jì)算上述4種結(jié)合物的染料/蛋白質(zhì)比例（DOS）。

3.6運(yùn)行上述4種綴合物的功能檢測，確定的染料/蛋白質(zhì)比例，以擴(kuò)大標(biāo)記反應(yīng)。