HPCE512系統(tǒng)基于多點檢測，克服了常規(guī)毛細管電泳（CE）存在的問題。與其它毛細管電泳系統(tǒng)相比，該儀器在定量、分辨率、靈敏度和重復性等方面均有較大的提高。這一顯著優(yōu)勢是通過比競爭系統(tǒng)收集更多的樣本數據, 然后使用專用的信號處理算法來區(qū)分與分析物相關的信號和來自于背景的噪聲。

詳細介紹

HPCE512

---展示毛細管電泳的非凡潛力

高效毛細管電泳的重大進步

傳統(tǒng)CE系統(tǒng)的數據質量往往很差。即使是相同的樣本，數據的重復性也很難達到要求。靈敏度被認為是不夠的，除非使用昂貴的、費時的標記技術，這些技術會對分析物的性質產生不利的影響。HPCE512作為一種免標記系統(tǒng)，既可以減少分析成本，又可以解決常規(guī)CE的問題。

HPCE512以每秒10到15次的速度對512像素光電二極管陣列上的每個分析物帶進行成像，因此，每個分子帶(在這個例子中是蛋白質)的傳輸在時間和距離上可以被追蹤。

追蹤分析物的直線斜率取決于分子的特性（例如分子量、所選操作模式的電荷/質量）

直線度表示分離條件的保真度，所有不同蛋白質的軌跡可回到一個共同的注射點或頂點。

軟件可以識別出與任何頂點軌跡不一致（紅色顯示）的信號，并將其作為背景噪聲丟棄。

結果可以在背景干擾非常小的情況下對規(guī)定的峰進行明確地分析。

這種處理方式不需要使用標記化學品，可實現(xiàn)高分辨率、可量化和可重復的分析。

更好的數據結果分辨率、重復性和定量準確度

在HPCE512系統(tǒng)中使用的512像素光電二極管陣列檢測器，可以通過每次分析捕獲更大的數據量。

強大的信號處理算法可消除背景噪聲，使得每個組分都可以得到分離和量化。

氨基酸標準溶液(Sigma A 6407)的EVA處理數據

高分辨率數據

案例—核糖核酸酶B及其5種糖型分析

圖像顯示了這種糖蛋白的毛細管凝膠電泳，分辨率＜200Da（1 甘露糖=162Da），得到的數據結果可與一些形式的質譜結果相媲美。

強大的數據處理算法可在小于200 道爾頓的分辨率下分析糖蛋白。

自診斷功能連續(xù)監(jiān)測毛細管和緩沖液條件

電滲流問題

熔融石英毛細管的表面存在硅羥基，這些硅羥基在常見電泳介質的存在下被離子化并在見的pH條件下帶上負電荷，從而形成雙電層，該雙電層即使在電場和具有大量陽離子的可移動區(qū)域的影響下也不會移動。在這個致密層之外，是一個中性電解液的擴散層。

當電位差作用于毛細管時，可移動層中的陽離子向陰極方向遷移。離子在電解質中被溶劑化，因此大量電解質緩沖液也向陰極方向移動。這種流體的流動被稱為電滲流（EOF），如果不通過多點檢測進行監(jiān)控并通過毛細管調節(jié)進行控制，則會導致數據質量下降，尤其是數據的重復性不好。

HPCE方法

多點檢測允許在其信號處理算法中將基于空間和距離的數據集生成為等相位圖。然后可以將其用于每次運行的檢查中，以查看毛細管中的條件是否已影響數據。通過觀察等相位圖中分析物譜帶或緩沖液成分的行為，可以監(jiān)控任何特定分離中的EOF。這樣可以優(yōu)化毛細管條件和其他參數（例如pH值、溫度、緩沖液等），從而在可重復性，分離度和定量方面產生明顯優(yōu)異的數據。