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ELISA法基本原理

2012年07月24日 09:48:28人氣:1333來源:上海滬宇生物科技有限公司

ELISA法基本原理

    它采用抗原與抗體的特異反應(yīng)將待測物與酶連接,然后通過酶與底物產(chǎn)生顏色反應(yīng),用于定量測定。測定的對象可以是抗體也可以是抗原。

 

 在這種測定方法中有3種必要的試劑:

    ①固相的抗原或抗體(免疫吸附劑)

    ②酶標(biāo)記的抗原或抗體(標(biāo)記物)

    ③酶作用的底物(顯色劑)

 

 

 測量時,抗原(抗體)先結(jié)合在固相載體上,但仍保留其免疫活性,然后加一種抗體(抗原)與酶結(jié)合成的偶聯(lián)物(標(biāo)記物),此偶聯(lián)物仍保留其原免疫活性與酶活性,當(dāng)偶聯(lián)物與固相載體上的抗原(抗體)反應(yīng)結(jié)合后,再加上酶的相應(yīng)底物,即起催化水解或氧化還原反應(yīng)而呈顏色。

 

  

  其所生成的顏色深淺與欲測的抗原(抗體)含量成正比。 這種有色產(chǎn)物可用肉眼、光學(xué)顯微鏡、電子顯微鏡觀察,也可以用分光光度計(酶標(biāo)儀)加以測定。其方法簡單,方便訊速,特異性強(qiáng)。

 

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