上海莼試生物技術(shù)有限公司
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上海市
更新時(shí)間:2024-10-03 08:34:09瀏覽次數(shù):25
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組織來源 | 滑膜 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
---|---|---|---|
生長特性 | 貼壁 | 細(xì)胞形態(tài) | 成纖維細(xì)胞樣 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
原代細(xì)胞VS細(xì)胞系:
用酶或機(jī)械方法直接從人或動(dòng)物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說,從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞,絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān)),再加上取材,成本等因素,通常會(huì)把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。
人滑膜成纖維細(xì)胞(類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎)
商品屬性:
組織來源 | 滑膜 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號(hào) | CS-X3454 | 生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞簡介:
人滑膜成纖維細(xì)胞分離自滑膜組織;滑膜組織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu),各種關(guān)節(jié)內(nèi)疾病均會(huì)累及滑膜。而滑膜細(xì)胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),同時(shí)在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位。骨關(guān)節(jié)炎(OA)以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?,其病理改變累及關(guān)節(jié)的各個(gè)組成部分,但絕不僅局限于軟骨,還包括軟骨下骨、滑膜、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響,相互作用,共同加速關(guān)節(jié)的退變?;ぜ?xì)胞是構(gòu)成滑膜層的細(xì)胞群體,是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),它包埋在顆粒狀無定性的基質(zhì)中,基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布?;び?span>A型(巨噬樣滑膜細(xì)胞)、B型(成纖維樣滑膜細(xì)胞)以及C型(樹突細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞)細(xì)胞組成。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(RA)是一種病因未明的慢性、以炎性滑膜炎為主的系統(tǒng)性疾病。其特征是手、足小關(guān)節(jié)的多關(guān)節(jié)、對稱性、侵襲性關(guān)節(jié)炎癥,經(jīng)常伴有關(guān)節(jié)外器官受累及血清類風(fēng)濕因子陽性,可以導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形及功能喪失。RA的發(fā)病可能與遺傳、感染、性激素等有關(guān)。RA關(guān)節(jié)炎的病理主要有滑膜襯里細(xì)胞增生、間質(zhì)大量炎性細(xì)胞浸潤,以及微血管的新生、血管翳的形成及軟骨和骨組織的破壞等。體外培養(yǎng)人滑膜成纖維細(xì)胞)對于研究類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎疾病的發(fā)生機(jī)理、治療具有重要意義。
方法簡介:
實(shí)驗(yàn)室分離的人滑膜成纖維(類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
質(zhì)量檢測:
實(shí)驗(yàn)室分離的人滑膜成纖維細(xì)胞采用混合酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳3-5代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細(xì)胞一般傳至10代左右,大部分細(xì)胞衰老死亡,但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去,存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代,叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會(huì)出現(xiàn)“危機(jī)",這時(shí)有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn),從而可能無限制地傳代下去,稱為細(xì)胞系。
也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系,因此,細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞,廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法,從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。
細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價(jià)格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn),也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯(cuò)誤鑒定及交叉污染的問題。
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VEGFA重組小鼠 VEGFA / VEGF164 蛋白 Protein
AT1R/AGTR1(Angiotensin II Type 1 Receptor 0.5mgAT1R/AGTR1(Angiotensin II Type 1 Receptor) 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗原
VRK1重組人 VRK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
FABP4 Protein Human 重組人 FABP4 / ALBP / A-FABP 蛋白 (29 Ala/Thr, His 標(biāo)簽)
MSR1 Protein Rat 重組大鼠 MSR1 / SCARA1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
人滑膜成纖維細(xì)胞(類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎)AT1R/AGTR1(Angiotensin II Type 1 Receptor 0.5mgAT1R/AGTR1(Angiotensin II Type 1 Receptor) 血管緊張素Ⅱ-1型受體抗原
FABP4 Protein Human 重組人 FABP4 / ALBP / A-FABP 蛋白 (29 Ala/Thr, His 標(biāo)簽)
VEGFA重組小鼠 VEGFA / VEGF164 蛋白 Protein
MSR1 Protein Rat 重組大鼠 MSR1 / SCARA1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
VRK1重組人 VRK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟:
1、準(zhǔn)備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺(tái)面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局:點(diǎn)燃酒精燈,安裝吸管帽。
3、處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動(dòng)一次,如用電磁恒溫?cái)嚢杵飨?。消化時(shí)間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時(shí),可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個(gè)細(xì)胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500-1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7、計(jì)數(shù):用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大,再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說,pH要求在7.2-7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。
8、培養(yǎng):置于37℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時(shí)需要換新塞。