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原代細(xì)胞VS細(xì)胞系：

用酶或機(jī)械方法直接從人或動物組織中分離出來的細(xì)胞。嚴(yán)格來說，從機(jī)體分離出來到傳代之前的細(xì)胞稱為原代細(xì)胞，絕大部分的原代細(xì)胞在體外可以分裂10-15次(這與細(xì)胞的端粒長短有關(guān))，再加上取材，成本等因素，通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞。

人皮膚肥大細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡介：

人皮膚肥大分離自皮膚組織；皮膚肥大細(xì)胞廣泛分布于皮膚微血管周圍，分泌多種細(xì)胞因子，參與免疫調(diào)節(jié)（T細(xì)胞、B細(xì)胞、APC細(xì)胞活化）。皮膚肥大細(xì)胞表達(dá)MHC分子、B7分子，具有APC功能。表達(dá)大量的IgE-Fc受體，釋放過敏介質(zhì)。具有弱吞噬功能，和血液的嗜堿粒細(xì)胞同樣，具有強(qiáng)嗜堿性顆粒的組織細(xì)胞。存在于血液中的這類顆粒，含有肝素、組織胺、5-羥色胺，由細(xì)胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質(zhì)，可在組織內(nèi)引起速發(fā)型過敏反應(yīng)（炎癥）。由于在肥大細(xì)胞上結(jié)合的IgE抗體和抗原的接觸，使細(xì)胞多陷于崩壞。肥大細(xì)胞呈圓形或卵圓形，細(xì)胞核小，呈圓形或橢圓形，染色淺，位于細(xì)胞中央。細(xì)胞常成堆或單個分布于血管附近。細(xì)胞呈圓形或卵圓形，細(xì)胞質(zhì)中充滿大小一致、染成藍(lán)紫色的顆粒，均勻分布在核周圍。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人皮膚肥大經(jīng)MCG-35免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的人皮膚肥大采用膠原酶-混合消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

原代細(xì)胞一般傳至10代左右，大部分細(xì)胞衰老死亡，但是有極少數(shù)的細(xì)胞能夠度過“危機(jī)"而繼續(xù)傳下去，存活的細(xì)胞一般能夠傳到40-50代，叫細(xì)胞株。當(dāng)50代以后又會出現(xiàn)“危機(jī)"，這時有部分細(xì)胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c(diǎn)，從而可能無限制地傳代下去，稱為細(xì)胞系。

也有認(rèn)為細(xì)胞系指原代細(xì)胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細(xì)胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細(xì)胞。由此便引申出了后來的有限細(xì)胞系、無限細(xì)胞系，因此，細(xì)胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細(xì)胞，廣義是指可傳代的細(xì)胞。而細(xì)胞株是通過選擇法或克隆形成法，從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的單一細(xì)胞稱為細(xì)胞株。

細(xì)胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點(diǎn)，也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。

公司正在銷售的產(chǎn)品：

小鼠血小板活化因子(PAF)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat azidothymidine (AZT) ELISA Kit 大鼠(AZT)ELISA試劑盒

HumanαN-acetylglucosaminidase,αNAGELISAKit 人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor(Mouseai-IVIgGaibody)ELISAKit小鼠抗IVIgG抗體規(guī)格：48T/96T

飲料乙酰舒泛(acesulfameK)含量高效液相色譜法定量檢測試劑盒20次

MouseIerleukin5,IL-5ELISAKit小鼠白介素-5(IL-5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠孕受體(PROGR)ELISAkit   ELISA.   96T/48T

小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白6(IGFBP-6)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠肺部活化調(diào)節(jié)趨化因子(PARC/CCL18)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

中文名稱   方法   規(guī)格

大鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)ELISA試劑盒 ，英文名： CCK ELISA Kit

Porcine fibrinogen degradation product (FDP) ELISA Kit 豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)ELISA試劑盒

ELISA 小鼠Active Caspase-3 48T/96T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforLPL(Humanlipoproteinlipase)ELISAKit人脂蛋白脂酶規(guī)格：48T/96T

通用腺病毒骨架載體(pAdEasy-1)500納克

ELISAKitC3SP雞補(bǔ)體3裂解產(chǎn)物規(guī)格：48T/96T

CDC37重組小鼠 CDC37 / CDC37A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

骨形成蛋白6(BMP6)重組蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 6 (BMP6)

ARF3重組人 ARF3 / ADP-ribosylation factor 3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CD300C Protein Human 重組人 CD300C / CMRF-35 / IGSF16 蛋白 (His 標(biāo)簽)

FGF1 Protein Canine 重組狗 aFGF / FGF1 蛋白

人皮膚肥大細(xì)胞骨形成蛋白6(BMP6)重組蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 6 (BMP6)

CD300C Protein Human 重組人 CD300C / CMRF-35 / IGSF16 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CDC37重組小鼠 CDC37 / CDC37A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

FGF1 Protein Canine 重組狗 aFGF / FGF1 蛋白

ARF3重組人 ARF3 / ADP-ribosylation factor 3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

原代細(xì)胞培養(yǎng)的具體步驟：

1、準(zhǔn)備：取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面，紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。

2、布局：點(diǎn)燃酒精燈，安裝吸管帽。

3、處理組織：把組織塊置于燒杯中，用Hanks液漂洗2-3次，去除血污；如懷疑組織可能污染，可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。

5、消化：或用恒溫水浴，或置于37℃溫箱消化均可，消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次，如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。

6、分離：在消化過程中見消化液發(fā)混濁時，可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察，如組織已分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞，立即終止消化，隨即通過適宜不銹鋼篩，濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速（500-1000轉(zhuǎn)/分）離心消化液5分鐘，吸出上清，加入適量含有血清的培養(yǎng)液。

7、計數(shù)：用計數(shù)板計數(shù)，如細(xì)胞懸液細(xì)胞密度過大，再補(bǔ)加培養(yǎng)液調(diào)整后，分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細(xì)胞來說，pH要求在7.2-7.4范圍，培養(yǎng)液呈微紅色，如顏色偏黃，說明液體變酸，可用NaHCO3調(diào)整。

8、培養(yǎng)：置于37℃溫箱培養(yǎng)，如用CO2溫箱培養(yǎng)，瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞，紗布塞易生霉菌，每次換液時需要換新塞。