上海莼試生物技術(shù)有限公司
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參考價 | ¥1-¥5800 | /件 |
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所在地
上海市
更新時間:2024-10-03 13:37:19瀏覽次數(shù):37
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原代細胞VS細胞系:
用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說,從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞,絕大部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次(這與細胞的端粒長短有關(guān)),再加上取材,成本等因素,通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。
商品屬性:
組織來源 | 脂肪組織 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
產(chǎn)品貨號 | CS-X3281 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞簡介:
人脂肪間充質(zhì)干分離自脂肪組織;脂肪組織主要由大量群集的脂肪細胞構(gòu)成,聚集成團的脂肪細胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉;貯存的脂肪,在需要時可迅速分解成甘油和脂肪酸,經(jīng)血液輸送到各組織以供利用。它們影響胰島素敏感性、血壓水平、內(nèi)皮功能、纖溶活動及炎癥反應(yīng),參與多種重要病理生理過程;脂肪組織已由過去單純作為能量儲存的器官而成為一個極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng)。脂肪組織中也存在一些干細胞群,具有自我更新能力和多向分化潛能,被稱為脂肪組織來源的間充質(zhì)干細胞,簡稱脂肪間充質(zhì)干細胞。與骨髓間充質(zhì)干細胞相比,在來源、細胞群特點以及分化潛能等多方面極為相似。但是,脂肪間充質(zhì)干細胞更易獲得足夠數(shù)量的細胞,且獲取過程中對機體損傷更小,是更為理想的自體干細胞源。脂肪組織分離得到脂肪間充質(zhì)干細胞以梭形為主要形態(tài),BrdU可標記其細胞核。
方法簡介:
公司實驗室分離的人脂肪間充質(zhì)干經(jīng)CD29、CD90免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人脂肪間充質(zhì)干采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細胞一般傳至10代左右,大部分細胞衰老死亡,但是有極少數(shù)的細胞能夠度過“危機"而繼續(xù)傳下去,存活的細胞一般能夠傳到40-50代,叫細胞株。當50代以后又會出現(xiàn)“危機",這時有部分細胞的遺傳物質(zhì)發(fā)生了改變且?guī)в邪┳兊奶攸c,從而可能無限制地傳代下去,稱為細胞系。
也有認為細胞系指原代細胞培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后所繁殖的細胞群體。也指可長期連續(xù)傳代的培養(yǎng)細胞。由此便引申出了后來的有限細胞系、無限細胞系,因此,細胞系狹義的是指可連續(xù)傳代的細胞,廣義是指可傳代的細胞。而細胞株是通過選擇法或克隆形成法,從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標志物的單一細胞稱為細胞株。
細胞系具有容易培養(yǎng)、種類多、價格便宜、無限傳代等優(yōu)點,也非常容易在培養(yǎng)、凍存中發(fā)生錯誤鑒定及交叉污染的問題。
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NA重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (His 標簽) Protein
phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185 0.2mlphospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 0酸化氨基末端激酶1/2/3(pJNK1/2/3)抗原
EGFR重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (His 標簽) Protein
CEP57 Protein Human 重組人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 標簽)
PF4 Protein Human 重組人 CXCL4 / PF4 蛋白
人脂肪間充質(zhì)干細胞phospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185 0.2mlphospho-JNK1/2/3(pThr183/pTyr185) peptide 0酸化氨基末端激酶1/2/3(pJNK1/2/3)抗原
CEP57 Protein Human 重組人 CEP57 / MVA2 蛋白 (GST 標簽)
NA重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (His 標簽) Protein
PF4 Protein Human 重組人 CXCL4 / PF4 蛋白
EGFR重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 (His 標簽) Protein
原代細胞培養(yǎng)的具體步驟:
1、準備:取各種已消毒的培養(yǎng)用品置于凈化臺面,紫外線消毒20分鐘。開始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。
2、布局:點燃酒精燈,安裝吸管帽。
3、處理組織:把組織塊置于燒杯中,用Hanks液漂洗2-3次,去除血污;如懷疑組織可能污染,可先置于含有青的混合液中30-60分鐘。
5、消化:或用恒溫水浴,或置于37℃溫箱消化均可,消化中每隔20分鐘應(yīng)搖動一次,如用電磁恒溫攪拌器消化更好。消化時間依組織塊的大小和組織的硬度而定。
6、分離:在消化過程中見消化液發(fā)混濁時,可用吸管吸出少許消化液在鏡下觀察,如組織已分散成細胞團或單個細胞,立即終止消化,隨即通過適宜不銹鋼篩,濾掉尚未充分消化開的組織塊。低速(500-1000轉(zhuǎn)/分)離心消化液5分鐘,吸出上清,加入適量含有血清的培養(yǎng)液。
7、計數(shù):用計數(shù)板計數(shù),如細胞懸液細胞密度過大,再補加培養(yǎng)液調(diào)整后,分裝入培養(yǎng)瓶中。對大多數(shù)細胞來說,pH要求在7.2-7.4范圍,培養(yǎng)液呈微紅色,如顏色偏黃,說明液體變酸,可用NaHCO3調(diào)整。
8、培養(yǎng):置于37℃溫箱培養(yǎng),如用CO2溫箱培養(yǎng),瓶口需用紗布棉塞或螺旋帽堵塞,紗布塞易生霉菌,每次換液時需要換新塞。