上海莼試生物技術有限公司
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參考價 | ¥1-¥5800 | /件 |
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型號
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所在地
上海市
更新時間:2024-10-03 14:05:25瀏覽次數(shù):41
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本產(chǎn)品僅供科學實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷!
產(chǎn)品名稱 | 組織來源 | 椎間盤組織 | |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞形態(tài) | 梭形、多角形 | 產(chǎn)品貨號 | CS-X3210 |
細胞簡介:
人椎間盤纖維環(huán)分離自椎間盤組織;椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,由軟骨板、纖維環(huán)、髓核組成的一個密封體。上下有軟骨板,是透明軟骨復蓋于椎體上,下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構成,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,使纖維環(huán)成為堅實的組織,能承受較大的彎曲和扭轉負荷。纖維環(huán)的前側及兩側較厚,而后側較薄。纖維環(huán)的前部有強大的前縱韌帶,后側的后縱韌帶較窄、較薄。纖維環(huán)細胞密度為9000個細胞/mm3,其外層的細胞呈梭型,主要屬于纖維細胞,內(nèi)層細胞呈圓形,主要屬于軟骨細胞。在培養(yǎng)的情況下,用透射電鏡觀察則有許多共同的超微結構表現(xiàn),它們的核較圓,核仁較明顯。細胞質(zhì)內(nèi)可見大量的附有核糖體顆粒的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。細胞質(zhì)內(nèi)線粒體多,為橢圓形,有的可看到雙層單位膜,由單位膜包繞初級深酶體和次級深酶體。細胞質(zhì)內(nèi)有一系列的扁平囊及小泡主成的高爾基復合體和分泌顆粒,纖維環(huán)細胞合成分泌蛋白多糖及膠原纖維的能力很旺盛,保證纖維環(huán)生理代謝活動所需的構造物質(zhì)的供給。一但這種供給減少,纖維環(huán)的生物性能就會減弱,椎間盤開始退變。
原代細胞培養(yǎng)條件:
?溫度?:通常在37℃下進行,以模擬體內(nèi)溫度。
?pH值?:培養(yǎng)液的pH值應保持在7.2~7.4之間,以維持細胞的正常生理狀態(tài)。
?氣體環(huán)境?:在含有5% CO2的培養(yǎng)箱中進行,以促進細胞生長。
?培養(yǎng)基?:使用含有適當營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基,如Eagle's MEM、DMEM等。
?無菌操作?:整個培養(yǎng)過程需要在無菌條件下進行,以防止污染。
方法簡介:
公司實驗室分離的人椎間盤纖維環(huán)經(jīng)Ⅰ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人椎間盤纖維環(huán)采用膠原酶-聯(lián)合消化法并結合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×105cells/瓶。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
原代細胞培養(yǎng)的具體操作步驟如下:
?組織處理?:將動物組織從機體中取出,剪碎后用等消化酶處理,使其分散成單個細胞。
?細胞計數(shù)?:使用血細胞計數(shù)器或其他方法對細胞進行計數(shù),確保細胞密度適中。
?接種培養(yǎng)?:將細胞懸液接種到培養(yǎng)瓶中,加入適量的培養(yǎng)基,置于37℃、5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?換液和傳代?:定期更換培養(yǎng)液,當細胞達到一定密度時進行傳代培養(yǎng),以維持細胞的生長狀態(tài)。
原代細胞的4種培養(yǎng)方法:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
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