上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時(shí)間:2022-06-01 16:11:33瀏覽次數(shù):225
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操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
中文名稱:細(xì)胞內(nèi)鈣離子熒光探針(Fura-2 AM)
英文名稱:Fura-2 pentakis ester
產(chǎn)品規(guī)格:50微升
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-F0163832
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長(zhǎng)時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來(lái),此操作非常繁瑣,并且病毒在此過(guò)程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開(kāi)發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品介紹:
本品是常用的檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光探針之一。 用于細(xì)胞內(nèi)鈣離子檢測(cè)時(shí),Fura-2 AM的常用濃度為0.5-5μM。通常用含有0.5-5μM的Fura-2 AM的適當(dāng)溶液和細(xì)胞一起在4-37℃孵育15-60分鐘,即可完成熒光探針的裝載。 本Fura-2 AM(鈣離子熒光探針)是配制于無(wú)水DMSO(anhydrous DMSO)中的儲(chǔ)存液,濃度為2mM。 分子式:C44H47N3O24 分子量:1001.9 Fura-2 AM是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料。Fura-2 AM的熒光比較弱,大激發(fā)波長(zhǎng)為369nm,大發(fā)射波長(zhǎng)為 478nm,并且其熒光不會(huì)隨鈣離子濃度改變而改變。Fura-2 AM進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fura-2,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。Fura-2可以和鈣離子結(jié)合,結(jié)合鈣離子后在330-350nm激發(fā)光下可以產(chǎn)生較的熒光,而在380nm激發(fā)光下則會(huì)導(dǎo)致熒光減弱。這樣就可以使用340nm和380nm這兩個(gè)熒光的比值來(lái)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的鈣離子濃度,可以消除不同細(xì)胞樣品間熒光探針裝載效率的差異,熒光探針的滲漏,細(xì)胞厚度差異等一些誤差因素。Fura-2和鈣離子結(jié)合后,大激發(fā)波長(zhǎng)為335nm(大激發(fā)波長(zhǎng)隨離子濃度的的不同而有所不同),大發(fā)射波長(zhǎng)為505nm。實(shí)際檢測(cè)時(shí)推薦使用的激發(fā)波長(zhǎng)為340nm,發(fā)射波長(zhǎng)為510nm。如果做雙波長(zhǎng)檢測(cè),則推薦使用的激發(fā)波長(zhǎng)為340nm和380nm。Fura-2的激發(fā)光譜參考下圖,不同曲線表示不同鈣離子濃度時(shí)的激發(fā)光譜。 Fura-2相對(duì)而言有較的抗熒光淬滅能力,在熒光顯微鏡或其它熒光檢測(cè)設(shè)備上可以連續(xù)檢測(cè)1小時(shí)而不明顯影響其熒光效果。 注意事項(xiàng): 1. 本Fura-2 AM在4℃、冰浴等較低溫度情況下會(huì)凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。 2. 熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期6個(gè)月。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級(jí)容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級(jí)容器上用油性記號(hào)筆寫(xiě)明樣本的種類(lèi)、采樣時(shí)間、編號(hào)、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級(jí)容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級(jí)容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級(jí)容器內(nèi)。二級(jí)容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級(jí)容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車(chē)。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無(wú)-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長(zhǎng)期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
體液脯肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)菌脯肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞脯肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法
組織脯肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法
血液脯肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法
Human mannose (Mannose) ELISA Kit 人甘露糖(Mannose)elisa 2-Amino-4-chlorobenzothiazole 19952-47-7 中文名:2-氨基-4-氯苯并噻唑 分子式:C7H5ClN2S
Human maix exacellular phosphoglycoprotein (MEPE) ELISA Kit 人細(xì)胞外基質(zhì)0酸糖蛋白(MEPE)elisa 2,2-Bis(3-amino-4-hydroxyphenyl)hexafluoropropane 中文名:2,2-雙(3-氨基-4-羥)六氟丙烷 分子式:C15H12F6N2O2
Human lung cancer marker ELISA Kit 人肺癌標(biāo)志物elisa 2,6-Dimethoxy-1-acetonylquinol 中文名: 分子式:C11H14O5
Human lung cancer marker DR-70 (DR-70TM) ELISA Kit 人肺癌標(biāo)志物DR-70(DR-70TM)elisa 21-Deoxyneridienone B 924910-83-8 中文名: 分子式:C21H28O3
Human hepatocyte growth factor (HGF) ELISA Kit 人肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)elisa 2,4-Dihydroxypyridine 626-03-9 中文名: 分子式:C5H5NO2
細(xì)胞內(nèi)鈣離子熒光探針(Fura-2 AM) Lacidipine 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 ELISAKitTAFI人纖溶抑制因子規(guī)格:48T/96T
Lacidipine 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 小鼠肝脂酶(HL)elisa ,英文名: HL ELISA Kit
尼林 Nicergoline 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 大鼠游離脂肪酸(FFA)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratfreefattyacids,FFAELISAKit 96T/48T
Xylometazoline 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 人白介素31(IL-31)試劑盒 Human IL-31 ELISA Kit
Xylometazoline 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)ELISAKit人神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(-3)elisa規(guī)格:96T/48T
二氫鉀 Potassium Dihydrogen Phosphate 質(zhì)量規(guī)格:比色法含量測(cè)定 PAR-3(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微克
長(zhǎng)春胺 Vincamine 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 PorcineOsteocalcin/Boneglaprotein,OT/BGPelisa豬骨鈣素/骨谷蛋白(OT/BGP)elisa規(guī)格:96T/48T
鹽酸咪達(dá)普 Imidapril 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測(cè)定 小鼠型脂肪酸結(jié)合蛋白(L-FABP)elisa ,英文名: L-FABP ELISA Kit
喹 Piperaquine phosphate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 大鼠血小板膜糖蛋白ⅡbⅢa(GP-ⅡbⅢa/CD41+CD61)ELISA檢測(cè)試劑盒RatplateletmembraneglycoproteinⅡbⅢa,GP-ⅡbⅢaELISAKit 96T/48T
西沙必 Cisapride Monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:含量測(cè)定 人白介素3(IL-3)試劑盒 Human Ierleukin 3 ELISA KIT
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。