上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品: 進(jìn)口elisa試劑盒,細(xì)胞株,細(xì)胞系,菌種 |
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更新時(shí)間:2022-06-01 16:11:36瀏覽次數(shù):384
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操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)。
中文名稱:細(xì)胞內(nèi)pH熒光探針(BCECF AM)
英文名稱:Intracellular pH fluorescence probe
產(chǎn)品規(guī)格:50微升
發(fā)貨周期:1~3天
產(chǎn)品貨號:BJ-F0163833
生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中,常常需要從液體樣品(如血漿,培養(yǎng)基)中純化病毒,但由于病毒顆粒十分細(xì)小,傳統(tǒng)的分離方法是使用長時(shí)間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來,此操作非常繁瑣,并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品介紹:
本品是常用的檢測細(xì)胞內(nèi)pH的熒光探針,用于細(xì)胞內(nèi)pH檢測時(shí),常用的BCECF AM的濃度為1-10μM。本BCECF AM(pH熒光探針)是配制于無水DMSO(anhydrous DMSO)中的儲存液,濃度為5mM。 BCECF AM是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料。BCECF AM沒有熒光,進(jìn)入細(xì)胞后可以被細(xì)胞內(nèi)的酯酶剪切形成BCECF,從而被滯留在細(xì)胞內(nèi)。BCECF在適當(dāng)?shù)?/span>pH值情況下可以被激發(fā)形成綠色熒光。大激發(fā)波長和發(fā)射波長因pH的不同而有所不同,大激發(fā)波長大致在503nm左右,大發(fā)射波長大致在520nm左右,實(shí)際檢測時(shí)推薦使用的激發(fā)波長為488nm,發(fā)射波長為535nm。BCECF在不同pH條件下的發(fā)射光譜參考下圖。 BCECF AM不僅被廣泛用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞的研究,也有報(bào)道用于動(dòng)物組織、植物細(xì)胞、細(xì)菌和酵母等的細(xì)胞內(nèi)pH水平檢測。在有細(xì)胞內(nèi)pH變化的細(xì)胞毒性、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞粘附、藥物抵抗、細(xì)胞趨化等過程中BCECF AM被廣泛應(yīng)用。 注意事項(xiàng): 1. BCECF AM(pH熒光探針, 5mM)可能對人體有害,請注意適當(dāng)防護(hù)。 2. 本BCECF AM在4℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。 3. 熒光染料均存在淬滅問題,請盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。 儲存條件:-20℃,有效期12個(gè)月。 |
使用方法:本產(chǎn)品僅用于科研
注意:標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個(gè)人防護(hù)。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集:將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處,停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動(dòng)退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集:用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁,將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中,棄去拭子尾部,擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時(shí)間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封;每袋裝一份標(biāo)本。同時(shí)也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上,連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi),擰緊蓋,在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本,可以放在同一個(gè)二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力,內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險(xiǎn)標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運(yùn)輸箱內(nèi)(或疫苗運(yùn)輸箱),放入冰排,然后以柔軟物質(zhì)填充,并密封,由專人(2人)運(yùn)送,不得郵寄,最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時(shí)內(nèi)送達(dá),則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的,需在4℃冰箱短時(shí)間暫存,并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃~-40℃時(shí)不穩(wěn)定,故長期保存最好在-70℃溫度以下進(jìn)行。
體液脯肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法
細(xì)菌脯肽酶(prolidase;PLD)克林納(Chinard)比色法
細(xì)胞脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測試劑盒
組織脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測試劑盒
血液脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量檢測試劑盒
Human hepatocellular carcinoma aigen (PHC) ELISA Kit 人肝癌抗原(PHC)elisa 2-Acetamido-2-deoxy-D-glucose 中文名:N-乙酰氨基葡萄糖 分子式:C8H15NO6
Human heparin cofactor II (HC II) ELISA Kit 人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)elisa 2-[2-(2,2,2-Trifluoroethoxy)phenoxy]ethyl methanesulfonate 中文名: 分子式:C11H13F3O5S
Human heparin binding epidermal growth factor (HB-EGF) ELISA Kit 人肝素結(jié)合性表皮生長因子(HB-EGF)elisa 2-[(Acetylthio)methyl]-phenylpropionic acid 91702-98-6 中文名: 分子式:C12H14O3S
Human hea fatty acid binding protein (h-FABP) ELISA Kit 人心型脂肪酸結(jié)合蛋白(h-FABP)elisa (Z)-Lachnophyllum lactone 81122-95-4 中文名: 分子式:C10H10O2
Human galanin / galanin (GAL) ELISA Kit 人甘肽/甘素(GAL)elisa 2-Amino-5-nitrothiazole 中文名:2-氨基-5-硝基噻唑 分子式:C3H3N3O2S
細(xì)胞內(nèi)pH熒光探針(BCECF AM)鈉一水合物 Omeprazole Monohydrate 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 人抗型肝炎病毒抗體(ai-HCV)elisa規(guī)格:96T/48T
Dipivefrin 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 PAR-3蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25
甲基麥冬黃酮A Methylophiopogonone A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Porcineoxidizedlowdensitylipoprotein,OxLDLelisa豬氧化低密度脂蛋白(OxLDL)elisa規(guī)格:96T/48T
Penciclovir 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 小鼠肝再生擴(kuò)展生長因子(GFER)elisa ,英文名: GFER ELISA Kit
貝那普拉/苯那普拉 Benazeprilat 質(zhì)量規(guī)格:供HPLC法系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用 人波形蛋白(VIM)ELISA檢測試劑盒Humanvimein,VIMELISAKit 96T/48T
Aceclofenac 質(zhì)量規(guī)格:UV法含量測定 大鼠神經(jīng)絲蛋白(NF)試劑盒 Rat neurofilame protein,NF ELISA Kit
TG101209 TG-101209;TG 101209 質(zhì)量規(guī)格:>98%,選擇性JAK2抑制劑 英文名稱RatGlucose-dependeinsulin-releasingpolypeptideELISAKit大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)elisa規(guī)格:96T/48T
Azasetron 質(zhì)量規(guī)格:含量測定 活體細(xì)胞線粒體長期跟蹤試劑盒20
Propranolol 質(zhì)量規(guī)格:溶出度檢查 ELISAKitPAI-1人纖溶酶原激活物抑制因子1規(guī)格:48T/96T
Metadoxine 質(zhì)量規(guī)格:HPLC法含量測定 小鼠肝細(xì)胞生長因子受體(c-MET/HGFR)elisa ,英文名: c-MET/HGFR ELISA Kit
注意事項(xiàng):
①加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。